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猪瘟中和免疫荧光试验操作规程

猪瘟是一种严重的、可怕的猪传染病。为了防止猪瘟的爆发并控制疫情，对瘟疫点和

疫区进行的检测和排查显得至关重要。而免疫荧光试验是一种常用的检测方法。下面介绍

一下猪瘟中和免疫荧光试验的操作规程。

一、试验仪器与试剂

1.试验仪器：医用荧光显微镜、丙酮脱脂仪、超声清洗仪等；

2.试剂：抗猪瘟病毒血清、猪瘟病毒离体分离液、红细胞、荧光素等。

二、试验样品处理

1.猪瘟病毒离体分离液的制备：将猪瘟病毒A型、C型等不同株系分离液混合后，按1：

1000稀释，作为试验抗原。保持冷藏状态。

2.丙酮脱脂红细胞的制备：从猪的全血中取得，淋巴化学法处理后，用NSF缓冲液洗

涤多次，然后浓度调节至2%。

三、试验操作步骤

1.准备工作：

(1)取出所需试剂并放置在试验台上，保持洁净状态；

(2)将荧光显微镜插上电源并调整镜头至适宜位置；

(3)将丙酮脱脂红细胞和试验样本进行标记和分类，并在试验纸板上排列，以便使

用。

2.将红细胞悬液和猪瘟病毒离体分离液混合，使红细胞与病毒结合，形成红细胞病毒

复合物。

3.分别将红细胞病毒复合物、猪瘟抗体和荧光素混合，孵化于33℃、37℃、41℃等温

度下，让其反应。

4.荧光检测：将荧光显微镜的滤色镜片旋转至450-490nm，观察试验细胞的荧光强度，

从而判断样品是否呈阳性反应。

四、实验注意事项

1.在操作过程中必须佩戴手套、口罩、防护服等防护措施，确保实验室环境洁净和操

作人员的健康安全；

2.严格按照规定的时间、温度等条件操作试验过程，保证试验结果的准确性；

3.注意操作步骤中的样品分离、稀释等工作，确保实验品质量；

4.注意设备测量标准化，防止误差的产生。