梅山猪与从江香猪杂交后代的FSH-β基因遗传变异分析 .pdfVIP

梅山猪与从江香猪杂交后代的FSH-β基因遗传变异分析

粟朝芝;陈林;陈伟;张雄;张凯凯;韩雪

【摘要】为探究FSH-β基因遗传变异对MX猪的影响,实验以从江香猪(♂)×梅山

猪(♀)杂交后代为研究对象,利用PCR扩增技术结合直接测序,对FSH-β基因SNPs

位点进行筛选.结果:FSH-β基因135bp和231bp处分别发生了单核苷酸突变

135G/T、231A/G,遗传学分析显示这2个突变位点所对应的纯合子基因型频率均

为0.8846,杂合子基因频率均为0.1154,多态信息含量(PIC)为0.1121,属于低度多

态,遗传多样性并不丰富;经χ2适合性检验表明,2个位点均不处于Hardy

Weinberg平衡状态(P0.05).

【期刊名称】《贵州畜牧兽医》

【年(卷),期】2018(042)006

【总页数】4页(P13-16)

【关键词】MX猪;FSH-β基因;遗传变异

【作者】粟朝芝;陈林;陈伟;张雄;张凯凯;韩雪

【作者单位】贵州省农业科学院畜牧兽医研究所,贵州贵阳550005;贵州大学高原

山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学高原山地

动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵州贵阳550025;贵州省农业科学院畜牧

兽医研究所,贵州贵阳550005;贵州省农业科学院畜牧兽医研究所,贵州贵阳

550005;贵州省农业科学院畜牧兽医研究所,贵州贵阳550005

【正文语种】中文

【中图分类】S828.2;Q78

促卵泡β亚基(Folliclestimulatinghormonebetasubunit，FSH-β)是促卵泡激

素的2个亚基之一，也是促卵泡激素行使生物功能的主要依赖者，具有促进卵泡

形成和发育的功能，并能诱导动物排卵[1]。研究表明，FSH-β基因已经被确定为

影响猪产仔数的主效基因之一，可将其作为遗传学中有关繁殖性状研究的重要分子

标记[2～4]。高天等[5]研究指出，嘉兴黑猪FSH-β基因第2外显子区域发现了3

个SNPs位点，但突变位点与繁殖性状之间并无显著性关系。刘乙等[2]研究发现，

FSH-β基因多态性对大白猪总产仔数、总活仔数、健仔数等性状都有一定影响。

对非哺乳动物研究表明，雷州黑鸭FSH-β基因突变型个体不管是纯合子还是杂合

子其开产日龄、蛋重以及产蛋数量上都显著高于野生型纯合子个体[6]。

从江香猪是贵州省东南部特有的小型地方猪种，具有逆性强、耐粗饲、肉质鲜美、

营养丰富等特点[7]。本研究利用从江香猪梅山猪(♀)杂交后代(命名为MX猪)为材

料，用PCR扩增结合直接测序的方法，筛选FSH-β基因多态位点(SNPs)，同时分

析其在MX猪群体中的遗传变异情况，以期为MX猪品种选育提供分子理论依据。

1材料与方法

1.1试验材料MX猪由贵阳绿生源畜牧科技发展有限公司提供，饲养管理水平相同、

健康无病，随机挑选30头，采集猪耳组织样本，置于95%酒精中保存，送实验室

用于基因组DNA提取。

1.2基因组DNA提取试验采用血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒(购自北京

天根生化科技有限公司，型号：DP304-03)进行基因组DNA提取，微量紫外分光

光度计检测其浓度及D260nm值，1%琼脂糖凝胶检测其完整性，-20℃保存备

用。

1.3引物设计及PCR扩增根据GenBank发布的猪FSH-β基因序列

(NC_010444.4)，利用Primer5.0引物设计软件设计3对特异性引物，分别用于

外显子区域的扩增。引物由上海英潍捷基生物有限公司合成，引物信息见表1。

表1FSH-β基因扩增引物信息引物名称引物序列5’-3’预扩增大小(bp)退火温

度(℃)FSH-β-1F:ACAGTGCCAAAGCAATACR:ATGGGAACTCCAAGAAAA680

55FSH-β-2F:AGGAGGAGAATAAGAA-GAR:GAGGGAAGAAATAGACAC1228

57FSH-β-3F:TAGACATAAGGAGTAG-GAAAAGR:AACTAAAGGGGTTG-

GAAA133755

PCR扩增采用3