鲤STIM1介导的钙离子调控及其在LPS免疫刺激中的功能分析.pdf

⼭东师范⼤学硕⼠学位论⽂

⽬录

中⽂摘要I

AbstractIII

缩略词表VI

第⼀章综述1

1.1钙库操纵的钙离⼦内流1

1.1.1钙离⼦以及细胞内的钙通道1

1.1.2CRAC通道的发现及SOCE2

1.2STIM1蛋⽩3

1.2.1STIM1蛋⽩的发现3

1.2.2STIM蛋⽩的结构3

1.2.3STIM1和STIM26

1.2.4STIM1的异构体7

1.3Orai蛋⽩和CRAC通道8

1.3.1Orai蛋⽩的发现及其基本结构8

1.3.2Orai蛋⽩组成CRAC通道8

1.4免疫相关细胞中的SOCE9

1.5LPS刺激免疫相关研究进展10

1.6细胞内钙离⼦检测⽅法11

1.6.1荧光显微镜法检测细胞内钙离⼦11

1.6.2荧光酶标仪法检测细胞内钙离⼦12

1.7研究意义12

第⼆章鲤⻥、的基因克隆及序列分析

stim1orai14

2.1前⾔14

2.2实验材料14

⼭东师范⼤学硕⼠学位论⽂

2.2.1实验动物14

2.2.2实验试剂14

2.3实验⽅法16

2.3.1鲤⻥解剖与取材16

2.3.2总RNA提取16

2.3.3cDNA模板制备16

2.3.4引物设计16

鲤⻥、、、基因的克隆

2.3.5stim1astim1borai1orai217

、、、基因的⽣物信息学分析

2.3.6stim1astim1borai1orai218

2.4实验结果19

2.4.1stim1a,stim1b,orai1及orai2的基因序列分析19

2.4.2多序列⽐对28

2.4.3STIM1A,STIM1B,Orai1和Orai2的进化分析32

2.5讨论33

第三章鲤⻥stim1及orai在LPS刺激下的免疫应答分析35

3.1前⾔35

3.2实验材料35

3.2.1实验动物35

3.2.2实验试剂35

3.2.3实验仪器36

3.3实验⽅法37

3.3.1建⽴腹腔注射LPS免疫刺激模型37

3.3.2组织的提取37

3.3.