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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书
(10)申请公布号CN102206621A
(43)申请公布日2011.10.05
(21)申请号CN201110063769.4
(22)申请日2011.03.16
(71)申请人北京大学
地址100871北京市海淀区颐和园路5号
(72)发明人刘虎威周志贵周宇白玉
(74)专利代理机构北京万象新悦知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人贾晓玲
(51)Int.CI
权利要求说明书说明书幅图
(54)发明名称
一种基于阳离子交换膜的酶固定化
方法及酶微反应器
(57)摘要
本发明公开了一种基于阳离子交换
膜的酶固定化方法及酶微反应器,属于蛋
白质酶解技术领域。以阳离子交换膜作为
酶固定化的载体,实现该方法的酶微反应
器的核心组件-反应腔由第一和第二阳离子
交换膜(1)、(3)和聚醚醚酮薄膜(2)组成,聚
醚醚酮薄膜(2)夹在第一和第二阳离子交换
膜(1)和(3)之间。聚醚醚酮薄膜(2)上刻蚀的
微通道(4)穿透聚醚醚酮薄膜(2)的上下表
面。酶溶液连续通过酶微反应器2-10分钟
即可完成酶固定化过程,酶通过静电作用
和疏水作用固定在阳离子交换膜上。蛋白
质溶液连续通过酶微反应器,在数秒内即
可完成酶解。酶微反应器在每一次酶解后
快速再生,完全避免了不同蛋白质酶解结
果的干扰。
法律状态
法律状态公告日法律状态信息法律状态
权利要求说明书
1.一种酶固定化方法,以膜作为酶固定化的载体,静电结合用于酶固定,其特征在
于,所述载体为阳离子交换膜。
2.一种酶微反应器,其特征在于,酶微反应器的反应腔由第一阳离子交换膜、第二
阳离子交换膜以及一片刻蚀有微通道的聚醚醚酮(PEEK)薄膜组成,所述PEEK薄
膜夹在所述第一和第二阳离子交换膜之间。
3.如权利要求2所述的酶微反应器,其特征在于,所述PEEK薄膜的厚度为百微米
量级,所述微通道穿透所述PEEK薄膜的上、下表面。
4.如权利要求2所述的酶微反应器,其特征在于,通过机械压力或者粘合剂,所述
PEEK薄膜的上表面与所述第一阳离子交换膜的下表面紧密贴合,并且所述PEEK
薄膜的下表面与所述第二阳离子交换膜的上表面紧密贴合。
5.如权利要求2所述的酶微反应器,其特征在于,所述第一和第二阳离子交换膜的
外侧各紧密贴合第一和第二聚碳酸酯(PC)薄片用以支撑和固定膜,所述第二阳离子
交换膜的长度小于所述第二PC薄片的长度,所述第一和第二阳离子交换膜位于所
述第一和第二PC薄片的中间位置处。
6.如权利要求5所述的酶微反应器,其特征在于,在所述第二PC薄片的上表面具
有机械加工的相同尺寸的第一微槽和第二微槽,所述第一和第二微槽的一端对应于
所述微通道的端点,另一端为所述第二PC薄片的边缘。
7.如权利要求6所述的酶微反应器,其特征在于,通过在第二阳离子交换膜的上表
面指压一根毛细管将所述第二阳离子交换膜对应于所述第一和第二微槽的部分膜分
别内陷于所述第一和第二微槽中,将第一PEEK管和第二PEEK管分别放置于所述
第一和第二微槽中,所述第一和第二PEEK管的一部分位于陷入微槽的第二阳离子
交换膜的上表面,用环氧树脂结构胶将所述第一和第二PEEK管位于所述第一和第
二微槽的部分固定在所述第一和第二微槽中,所述PEEK薄膜与所述第二阳离子交
换膜紧密贴合后,所述第一和第二PEEK管与所述微通道相通。
8.如权利要求2至7所述的酶微反应器,其特征在于,所有上述结构夹在两个铝块
之间的中间位置处,四角分别用长度大于两个铝块与上述结构的总厚度的螺丝固定。
9.如权利要求2所述的酶微反应器,其特征在于,所述酶微反应器在完成一次蛋白
质样品酶解后,依次通过含NaOH的NaCl、HCl和纯水,使
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