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赛默飞高效液相色谱使用方法

一、样品准备

在进行高效液相色谱分析之前，需要准备好待测样品。样品应尽可能

纯净，避免含有杂质和污染物。如果样品中含有大量杂质，可能会堵

塞色谱柱、污染检测器，并影响分析结果。在准备样品时，应根据实

验要求选择适当的提取、分离和纯化方法，以保证样品的纯度和浓度

满足分析要求。

二、仪器准备

在开始高效液相色谱分析之前，需要检查仪器是否正常工作，包括高

效液相色谱仪、检测器、泵、进样器等。确保仪器的各项参数设置正

确，例如流速、波长、增益等。同时，需要准备好足够的流动相、色

谱柱、样品瓶等耗材，并确保其质量合格。

三、流动相配制

高效液相色谱分析中，流动相是重要的组成部分。根据实验要求，选

择适当的流动相，并按照所需的浓度进行配制。在配制流动相时，应

使用高纯度的试剂，避免使用含有杂质或沉淀的溶剂。同时，需要充

分混合流动相，以保证其在色谱柱中均匀流动。

四、泵操作

泵是高效液相色谱仪中的重要组成部分，负责提供稳定的流动相流量。

在操作泵时，应注意以下几点：

1.确保泵的各项参数设置正确，例如流量、压力等；

2.在启动泵之前，应先打开泵的排气阀，将泵内的空气排出；

3.在泵运行过程中，应注意观察泵的压力和流量是否稳定，如有异

常应及时处理；

4.定期对泵进行维护和清洗，以保证其正常工作。

五、样品进样

在高效液相色谱分析中，进样是关键的步骤之一。将样品注入色谱柱

中，需要注意以下几点：

1.确保进样器清洁干燥；

2.将样品注入进样器中，并确保没有气泡；

3.在进样之前，先进行一次空白注射，以清洗管路和检测器；

4.每次进样量应根据实验要求进行选择。

六、检测器设置

检测器是高效液相色谱仪中的重要组成部分，用于检测色谱柱中流出

的组分。在设置检测器时，应注意以下几点：

1.根据实验要求选择适当的检测器类型；

2.确保检测器的各项参数设置正确，例如波长、增益等；

3.在检测过程中，应注意观察检测器的响应情况，如有异常应及时

处理。

七、数据采集与处理

在高效液相色谱分析中，数据采集与处理是关键的步骤之一。通过采

集色谱图上的信号，可以得到各个组分的保留时间、峰高、峰面积等

数据。在处理数据时，应注意以下几点：

1.选择适当的峰识别方法，正确区分各个组分的峰；

2.对各个组分的峰进行定量和定性分析；

3.根据实验要求对数据进行处理和解析。

八、清洗与维护

为了保持高效液相色谱仪的正常运行和提高其使用寿命，需要定期进

行清洗和维护。清洗和维护的内容包括：清洗色谱柱、更换密封圈、

更换滤芯、清洗检测器等。