实验四-尿标本的微生物学检验PPT课件.ppt

实验四尿标本的微生物学检验1.2019/11/26

实验目的：掌握尿液标本的采集与处理、常见病原菌及一般微生物学检验程序和细菌计数方法。掌握大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌的微生物学鉴定方法和生物学性状。2.2019/11/26

尿标本的采集与处理：正常人的尿液通常是无菌的，但在外尿道除有正常菌群外，尚有其他一些病原菌和条件致病菌，可通过多种途径引起尿路感染（urinarytractinfection,UTI）。如：葡萄球菌、链球菌、肠球菌、大肠埃希氏菌、变形杆菌等。标本采集方法常有五种：导尿法、中段尿采集法、肾盂尿采集法、膀胱穿刺采集法、留尿法。3.2019/11/26

1）导尿法：采取导尿管导尿，是一种较好的无菌采集法，可直接插导管采集尿液标本或滞留导管集尿。直接导尿先让尿流弃15ml，滞留导管集尿先用70%酒精消毒导管口再用针筒抽取，取尿量为10～15ml，直接导尿有将尿道细菌进入膀胱的危险，尽量避免此方法。2）中段尿采集法：目前国内临床常用此法。女性病人先用肥皂水或1:1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴及尿道口；男性病人应翻转包皮冲洗，用1:1000新洁尔灭消毒尿道口；用无菌生理盐水或无菌水冲去消毒液，再用灭菌纱布擦干，让病人排尿，弃去前段尿，收集中段尿10～20ml，置于无菌容器内，立即加盖送检。4.2019/11/26

3）肾盂尿采集法：由泌尿科医生在膀胱镜下分别采集左右侧输尿管的尿液，并做好标记，以防左右侧错位，尿液采集量不少于1ml。4）膀胱穿刺采集法：在病人耻骨上膀胱区用碘酒、酒精消毒（要求病人不排尿充盈膀胱）以无菌针筒做膀胱穿刺，抽取尿液后针筒插入橡皮塞送检。此法主要用于厌氧培养。5）留尿法：疑为尿道结核患者，可用一洁净容器，留取24h尿液，取其沉淀部分盛于清洁瓶内送检。5.2019/11/26

通常取晨起第一次尿送检。由于治疗所用药物多数均通过尿液排泄，因此，无论用何种方法采集尿液都宜在用药前进行。尿液标本的采取和培养最大的问题是污染杂菌，故应严格进行无菌操作尿液标本中不得加防腐剂，否则会影响检出的阳性率。尿液标本采集后要立即送检（常规2h内）或存放于4℃冰箱（不超过24h，教材规定为8h），因搁置时间稍长尿中病原菌可在室温中增殖，而影响细菌计数的正确性。应注意淋病奈瑟菌培养时标本不能冷藏保存。6.2019/11/26

常见病原菌：医院内引起UTI的病原菌70%为革兰氏阴性杆菌，其中以肠杆菌科和假单胞菌属的细菌为主；革兰氏阳性菌约占20%，其中以葡萄球菌和肠球菌为多见。由于抗菌素的广泛应用，近年来真菌性UTI增多，约占10%。7.2019/11/26

检验程序：尿标本直接涂片染色分离培养细菌计数直接药敏试验（特殊细菌检查离心沉淀）BA、中国蓝或麦康凯平板（常规培养）血清学鉴定生化鉴定药敏试验确定病原菌定量培养直接计数35℃18～24h观察菌落形态、涂片染色镜检发报告8.2019/11/26

检验程序：革兰阴性杆菌氧化酶（Oxi）-+肠杆菌科细菌非发酵菌氧化酶阴性非发酵菌：不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌。氧化酶阳性其他革兰阴性菌：巴斯德菌、气单胞菌、邻单胞菌和弧菌属等也是氧化酶阳性。9.2019/11/26

麦康凯平板（Mac）：是一种肠道杆菌专用的弱选择性培养基。培养基成分中除基础成分外，主要含有0.5%胆盐、1%乳糖、中性红指示剂。胆盐：一方面对沙门氏菌有刺激生