Agress高效液相色谱操作规程(折光检测器) .pdfVIP

Agress高效液相色谱仪操作规程(折光检测器）

1.目的

规范Agress1100高效液相色谱系统的使用和维护。

2.范围

本规程适用于Agress1100高效液相色谱系统的使用和维护。

3.职责

仪器室分析人员负责Agress1100高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4.系统组成

本系统由P1100高压恒流泵、D1100紫外-可见检测器、Rheodyne7725i手动进样阀、Elitapex色谱工作

站、计算机以组成。

5.程序

5.1.准备

（1）使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（色谱纯；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、

配置样品和标准品（必须用0.45μm滤膜过滤）、选择合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）、

与7725i进样阀配套的进样器和定量管。

（2）通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

5.2.开机和泵操作

（一）开机

1.接通电源，依次打开P1100泵、D1100检测器，待仪器自检结束显示正常状态后，打开电脑显

示器、计算机。

（二）排气

1.打开P1201泵后，打开放空阀(逆时针转动放空阀手柄至90度)；

2.按冲洗键使泵用最大流量对流动相进行排气，若流动相管路中存在明显的空气要使用配件中的

20ml吸液针管连接到放空阀出口管处进行抽取，直至抽出液体，然后关闭放空阀，拔下针管，连

接好管路，拧开放空阀重新排气；

3.排气完毕后将放空阀顺时针拧紧；

（三）打开工作站

1.点击Elitapex启动图标，按[确定」，进入系统主界面。点击仪器控制菜单，弹出系统配置、仪器

控制及光谱扫描选项，点击系统配置，将仪器列表中的仪器选项添加到系统配置选项中去后，（以实际

仪器配置为准）点击验证系统配置，如显示结果与系统配置中选顶一致，证明系统连接正常，电脑可对

仪器进行反控。点击仪器控制选项，对泵的流量、梯度曲线进行设置，同时对检测器波长设定及柱温箱

温度设定确认后，启动数据采集。则泵会按电脑设定流量开始运行。

2.检查泵、检测器是否按工作站设定运行。

3.在Elitapex窗口点击泵的启动（第四个快捷键），运行P1100泵，按检测器操作面板上的PURGE

键，点击基线监测图标（第五个快捷键）待基线走平后，再次按下PURGE键，停止基线采集。

4.关闭PURGE键后，再次点击基线监测图标，带基线走平后停止基线采集，准备进样。

5.3.平衡系统（分两种情况进行）

（一）等度模式

1.用所需流动相冲洗色谱柱及检测系统，检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液，如漏液应予

以排除。观察泵控制面板上的压力值，压力波动如在0.5MPa以上。可初步判断为柱前管路仍有气泡，

重复排气步骤。

2.采集基线。在Elitapex窗口点击基线监测图标（上数第五个快捷键），观察基线和压力变化。如

果10分钟后基线漂移100μv，噪声为500μv数量级，或纵坐标设为-10mv~10mv,最后10分钟基线显示

为水平直线，且压力平稳时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。

3.按结束当前数据采集图标（上数第七个快捷键），停止监视基线。准备进样。

（二）梯度模式

1.按检验方法规定的条件冲洗平衡系统，并注意压力波动变化和排气泡。在进样前运行1~2次空白梯

度。

5.4.进样

1.进样前，进样阀处于INJECT位置，将Elitapex窗口处于数据采集等待状态，按启动数据采集图标

（上数第六个快捷键）。用试样溶液清洗注射器3次以上，抽取适量并排除气泡后。

2.将注射器针完全插入进样阀入口中。将进样阀手柄转动至Load位置，平稳地注入试样溶液，除另

有规定外，让注射器留在进样阀上，将进样阀手柄快速转动至INJECT位置，系统将自动运行采集数据

并记录图谱。让进样阀手柄保持在INJECT位置，将注射器从进样阀中拔出。

5.5.数据处理（外标法）

1.左键按系统左界面下的定量图标，选择用标样计算的项目，弹出样品的定量方法设置窗口。

2.在窗口上按右键，分别点击打开标准样品、设置标准样品、计算定量曲线三步。

（1）在打开标准样品窗口中，逐项添加所要加的标准样品谱图。

（2）计算定量曲线则得出标准一次曲线；

（3）点击文件选项，点击打开中的打开数据，调出