临床真菌分离及耐药现状.ppt

氟康唑对191株酵母样真菌的敏感性氟康唑判断标准添加标题抑菌环19mmSMIC=8添加标题抑菌环15-18mmSDD16-48添加标题抑菌环14mmR=64菌株名称MIC50MIC90众数MIC白念0.51.50.5光滑4825648热带1.080.5近平滑1.02560.75克柔246424氟康唑对五种酵母样真菌的MIC分布320株“白念”对氟康唑的MIC分布下列真菌可能天然耐药镰孢菌属 挪威念珠菌 双相型真菌土曲霉 光滑念珠菌 新型隐球菌白吉利毛孢子菌 杜伯林念珠菌 白念珠菌S.apiospermum 曲霉菌属帚霉菌 葡萄牙念珠菌 曲霉菌属 两性霉素B 氟康唑 5-氟胞嘧啶葡萄牙念珠菌 克柔念珠菌 非白念珠菌2002年美国关于真菌血症的报道16个医院多中心调查：1986.6-1-2001年6.1,真菌血症的发生率是6.0/10万.其中大于50岁老年人占68%;小于50岁的中青年发生率为32%。门诊患者为4%；住院患者为96%，两着有显著差异P0.01美国254例真菌血症菌种分布真菌名称%白色念珠菌58光滑念珠菌20热带念珠菌11近平滑念珠菌7克柔念珠菌2其他念珠菌21980-1999年冰岛国报道真菌血症1980-1984年真菌血症发生率为1.4/10万1995-1999年真菌血症发生率为4.9/10万白色念珠菌占64.4%Pfaller1995年报道(英国）白色念珠菌1987年87%1992年为31%光滑念珠菌13%加拿大51家医院报道血液和体液真菌类别真菌名称1996年%1998年%白色念珠菌6454.3光滑念珠菌615.2近平滑念珠菌812.2热带念珠菌179.3解放军总医院1987-1998年59例真菌血症真菌名称%白色念珠菌16.9近平滑念珠菌23.7热带念珠菌20.3其他392000-2002年北京医院3166例血液培养真菌血症49例真菌名称%白色念珠菌30.8近平滑念珠菌36.5热带念珠菌20.4季也蒙念珠菌6.1无名念珠菌6.2真菌名称101例真菌血症259株其他标本白色念珠菌29.744.8其他念珠菌70.355.2南韩报道血液和其他标本真菌类别差异真菌实验室检测进展快速培养和鉴定35℃24-48h添加标题01单击此处添加小标题蓝色：白色念珠菌03单击此处添加小标题粉色：其他念珠菌05单击此处添加小标题显色沙氏琼脂02单击此处添加小标题紫色：热带念珠菌04分子生物学技术在真菌检测中的应用念珠菌病的PCR诊断：用白色念珠菌EO3的一对引物，白色念珠菌出现1.8kb片断，其他念珠菌无此片断。用寡核苷酸序列NS5和NS6作引物扩增出310bp真菌界高度保守rDNA片断。可区分真菌、细菌及人体细胞特异性100％。真菌药敏方法半自动鉴定系统：ATB系统可同时测定5种药物敏感性，包括5-氟胞嘧定、二新霉素B、制霉菌素、铜康唑、衣曲康唑。ETEST法：可同时测定一个药的MIC和敏感性（SＩR）。纸片扩散法：在K—B法的基础上改良，经济实用。酵母菌纸片扩散法药敏试验药敏纸片：氟康唑25ug/片。培养基：M—H加GMB添加剂。GMB：A：5mg/ml美兰，B：0.4g/ml葡萄糖。A200ul+B100ml即为GMB。10cm平皿中加GMB1.5ml，再加入MH培养基。在MH平皿表面倾入GMB1.5ml，室温5-24h待全部吸收后再作下一部操作。培养基配制：操作方法：5麦氏浓度菌悬液。同K—B法涂菌。15分钟后贴纸片。置35度培养18-24h或48h。判读结果。判断标准：S:=19mmMIC=8SDD(依赖剂量敏感):15-18mm。MIC：16-32ug/ml。R：=14mm,MIC:=64ug/ml质量控制:白念:ATCC9002828-39mm。近平滑:ATCC22019,22-33mm。热带：ATCC750，26-37mm。真菌感染诊断中存在的问题病人感染初期无症状，主管医生没有想到已经有真菌感染。细菌室按常规办事，未做真菌培养。真菌药敏不作为常规试验。真