中药药理实验方法学.pptVIP

小鼠、大鼠、豚鼠：颈椎脱位法处死。01兔、狗、猫：静脉注射空气（10~30ml）致死。02实验完毕后，动物按要求处死，送到指定地点焚烧。没有焚烧条件的，用袋子装好，送至指定垃圾站。03处死和处理方法药物因素---品种、产地、采集时节、贮藏、炮制、制剂（剂型）、不同入药部位02三大因素：药物因素、机体因素、环境因素01环境因素---气候、季节、时辰。04机体因素---年龄、性别、体质、情志、病理状态、个体差异（种族、高敏、耐受、特异质、肠道微生物环境等）03影响中药药理作用的因素鉴定品种、一次性计算出实验用药物量后购买药物进行制剂加工（排除品种、产地、采集时节、贮藏、炮制、制剂等带来的影响）选择和临床用药一致的剂型（给药途径）（排除因给药途径不同导致的差异--生物利用度不同）。01选择年龄相同、批次相同、性别体重均衡的动物，遵循随机分组的原则，减少动物带来的差异。02动物连续给药时每天应在基本相同的时间进行。03为减少差异，应注意：药效学：药物对机体的作用研究。按新药研究指南的要求，根据功能主治来设计实验项目。新药申报资料中，和药理学实验内容相关的是药效学和毒理学两大项内容。药效学研究注意事项0102注意点：主要指标确定，按新药指南要求或咨询药审中心确定。如抗癌中药研究模型的选择：有文献依据、符合中医临床“证”的模型，方法要注意体内、体外相结合。体外：重复性好，用药量少，节省动物。但干扰因素多。体内：结果接近临床，必须做。原则---体内、体外实验相结合。药品：品种鉴定（赤芍）、稳定工艺，现在要求用中试产品。量的问题。2低剂量--临床等效量3中剂量--临床等效量的2倍1剂量：一般设三个剂量4高剂量--临床等效量的4倍按人和动物的体表面积折算的等效剂量比值换算1小白鼠（20g）：人用量*0.0026*502大白鼠（200g）：人用量*0.018*53按“每公斤体重占有体表面积相对比值”换算4小鼠：人用量*1（小白鼠比值）/0.08（50Kg人的比值）5大鼠:人用量*0.47（大白鼠比值）/0.08（50Kg人的比值）6剂量换算临床常用剂量折算法一般设6个组：空白组、模型组、模型+小剂量组、模型+中剂量组、模型+大剂量组、模型+阳性对照组。阳性组设置的目的：检验实验方法是否正确、比较同类产品的优劣。阳性药：功效主治和实验药物一致，剂型尽量一致；必须是药典记载的、公认的疗效确切的药物。组的设置STEP01STEP02数据处理药理实验数据必须进行统计学处理。实验数据分为计量资料和计数资料。计量资料：尿量、时间、次数、心率、血压等计数资料（发生率）：死或活、惊厥或不惊厥、翻正反射消失或不消失、扭体或不扭等。不同资料统计方法不同，现在多用统计软件包处理。结果：P0.05,说明两组间无显著性差异P0.05,说明两组间有显著性差异P0.01,说明两组间有非常显著性差异举例:黄南星搽剂01随机分组-----将受试样本随机遇而分组，以减少主观因素的影响和避免偏性误差。对照：组间对照、自身对照重复：实验的重复。如条件不允许，可增加每组的样本数。0203药理实验设计三原则

-随机、对照、重复一般药理学研究：1神经系统：行为、流涎、肌颤、瞳孔、自发活动等；2心血管系统：血压、心率、心电图。3呼吸系统：呼吸的频率、深度。4剂量---选用产生主要药效作用的2~3个剂量。区别毒理学实验的剂量。5实验目的：观察药物一次性给药对动物带来的毒性和死亡情况。01020304通常测定半数致死量。如果求不出（毒性低），可测最大给药量。半数致死量---指一群动物中半数动物死亡的剂量。计算方法：比利氏法、孙氏改良蔻氏法等。急性毒性实验毒理学研究主要内容常规药理学实验基础知识开课目的：培养科学思维方法，严肃的科学态度，提高分析问题解决问题的能力。掌握基本实验操作技能和实验方法，为今后科学研究打下基础。要求：工作服、仪器领取、卫生打扫、动物处理。12实验动物分类：按种系分三种情况按遗传学控制方法分为4类：近交系动物、突交系动物、F1杂种动物、封闭群动物。未经遗传学控制的杂种动物。按微生物学控制方法分5类：无菌动物、悉生动物、无特殊病原体动物、清洁动物、普通动物。我国将实验动物分为四级：一级动物：普通动物（CV）---普通自然环境中饲养繁殖的健康带菌动物。（教学和一般实验用）二级动物：清洁动物（CL）---用于一般动物实验，除一级标准外，还需要不带有动物传染病病原体。三级动物：无特殊病原体动物（SPF），在CL基础上还需不带有干扰实验的微生物。