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一节核酸酶促降解.ppt

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尿嘧啶核苷酸合成途径UMP转变为CTP和dTMPUMPUDPdUDPUTPdUMPCTPdTMP还原酶TMP合成酶尿苷酸激酶二磷酸核苷激酶CTP合成酶NH3(Gln)ATP嘧啶从头合成的调节ATP+CO2+谷氨酰胺=氨基甲酰磷酸天冬氨酸=氨甲酰天冬氨酸PRPP||ATP+5磷酸核糖UMPUTPCTP----实线表示代谢途径;虚线表示调节途径;代表抑制-嘌呤核苷酸嘧啶核苷酸第一节核酸的酶促降解第三节核苷酸的合成第二节核苷酸分解代谢第一节核酸的酶促降解磷酸核酸酶核苷酸酶核苷酸磷酸化酶核酸核苷酸核苷碱基+戊糖一、核酸酶1、核酸酶的分类(1)根据对底物的专一性分为(2)根据切割位点分为核糖核酸酶(RNase)脱氧核糖核酸酶(DNase)非特异性核酸酶核酸内切酶核酸外切酶核酸内切兼外切酶1、外切核酸酶对核酸的水解位点5′ppppOHBpppp3′BBBBBBB牛脾磷酸二酯酶(5′端外切53)蛇毒磷酸二酯酶(3′端外切35)非特异性核酸酶,作用于DNA、RNA2、内切核酸酶对RNA的水解位点示意图5′ppppOHPyPuPyPy1′pppGACUpppGA3′RNaseIRNaseIRNaseT1RNaseT1Pu:嘌呤Py:嘧啶牛胰核酸酶曲霉核酸酶特异性核酸酶,只作用于RNA或DNA3、脱氧核糖核酸酶5′ppppOHBpppp3′BBBBBBB牛脾脱氧核糖核酸酶(DNaseII)牛胰脱氧核糖核酸酶(DNaseI)特异性核酸酶,只作用于DNA原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的序列,并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链,产生粘性末端或平齐末端,这类酶称为限制性内切酶(ristrictionendonuclease)。具有很强的专一性,有特异的识别位点,通常具有二重旋转对称性的回文序列12限制性内切酶型:分子量大于105,多亚基,需S-腺苷蛋氨酸、ATP和Mg2+,识别位点与切割位点相差甚远,产物为异质,是限制与修饰相排斥的多功能酶。01型:分子量小于105,需Mg2+,切割位点位于识别位点上,产物为专一性片段,不具修饰酶功能。现在分子生物学研究所用的限制性内切酶均为此类。02型:识别位点为5-7bp的非对称序列,切割位点在顺序之外离识别序列5-10bp,切割双链,个别也切割单链。是限制与修饰相多功能酶。03限制性内切酶类型常用的DNA限制性内切酶的专一性酶辨认的序列和切口说明‥‥AGCT‥‥‥‥TCGA‥‥‥‥GGATCC‥‥‥‥CCTAGG‥‥‥‥AGATCT‥‥‥‥TCTAGA‥‥‥‥GAATTC‥‥‥‥CTTAAG‥‥‥‥AAGCTT‥‥‥‥TTCGAA‥‥‥‥GTCGAC‥‥‥‥CAGCTG‥‥‥‥CCCGGG‥‥‥‥GGGCCC‥‥BamHIAluIBglIEcoRIHind

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