生物技术概论基因工程.ppt

SSR ?重复单元：1~6bp,如CA,CTCG ?重复次数：5~30次 ?覆盖长度：10~300bp第127页,共134页，星期六，2024年，5月４、序列特征扩增区域(SCAR)建立在DNA测序基础上的分子标记。先作RAPD、DNF\SSR分析，然后把标记片段克隆和测序，根据原片段两端的序列设计一对特定引物（通常16-24个碱基），再进行PCR特异扩增，这样就可把与原RAPD片段相对应的单一序列(位点)扩增出来。这样的DNA片段与原先的性状存在对应关系，就称为该性状的SCAR标记。第128页,共134页，星期六，2024年，5月RandomprimerRandomprimerspecificprimer1specificprimer2RAPDmarkerSCARmarkerSequencing随机产物：多种SCAR产物：一种第129页,共134页，星期六，2024年，5月SCAR比RAPD和其它利用随机引物的方法在基因定位和作图中的应用更好，因为它有更高的可重复性（原因是使用的引物长）。第130页,共134页，星期六，2024年，5月(三)建立在酶切和PCR基础上的分子标记6、扩增片段长度多态性(AFLP)：建立在RFLP和PCR基础上的标记方法。其基本步骤是：把DNA进行限制性内切酶酶切，然后选择特定的片段进行PCR扩增，在测序胶上分开这些扩增产物并检测其多态性。第131页,共134页，星期六，2024年，5月AFLP的实验过程AFLPAB第132页,共134页，星期六，2024年，5月荧光标记全自动AFLP原理与方法ForABI377DNASequencerandAFLPKitsAFLP第133页,共134页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第134页,共134页，星期六，2024年，5月********3、渗调蛋白基因(1)渗调蛋白(osmotin，OSM)，植物中普遍存在(2)作用机理：渗透调节4、胚胎后期丰富蛋白(lateralembryoaboundantprotein)基因(1)植物来源：禾本科植物(2)作用机理：渗透调节5、乙醇脱氢酶基因(1)植物中普遍存在：Adh-1,Adh-2(2)耐涝作用机理：缺氧ATP合成，解毒第95页,共134页，星期六，2024年，5月(八)耐贮性改良1、成熟激素相关基因改良:抑制乙烯产生作用(1)反义ACC合成酶(ACCsynthase)(2)反义ACC氧化酶(ACCoxidase,EthyleneformingEnzyme,EFE)(3)反义乙烯受体(Ethylenereciptor,ER)第96页,共134页，星期六，2024年，5月反义RNA技术AnantisenseoligobindsthesensemRNAand

preventssynthesisoftheproteincodedbythatmRNA第97页,共134页，星期六，2024年，5月2、细胞壁降解相关基因改良：抑制细胞壁降解(1)反义多聚半乳糖醛酸酶基因（PG）：(2)反义果胶裂解酶基因（PL）(3)反义果胶甲脂化酶基因（PE）(4)反义半乳糖苷酶基因(Gal)(5)反义木聚糖内基转移酶基因(XET)：(6)反义纤维素酶基因(cellulase)(7)反义聚木糖酶基因(XGase)第98页,共134页，星期六，2024年，5月3、软化相关胞内物质代谢基因(1)反义淀粉酶基因(amylase)(2)反义脂氧合酶基因(LOX)4、抗病性相关基因(1)PGIP第99页,共134页，星期六，2024年，5月(九)品质改良1、营养成分改良(1)贮藏蛋白：小麦醇溶蛋白基因：增加新蛋白质(2)脂肪改良：LOX基因：脂肪酸饱和度改变2、风味改良(3)甜味蛋白：来源于甜玉米，改变风味３、外观品质改良(4)着色度改良：色素基因工程：花色素第100页,共134页，星期六，2024年，5月*转基因西红柿散发柠檬香味和玫瑰芳香的转基因西红柿第101页,共134页，星期六，2024年，5月*无子的转基因茄子(意大利)??

第102页,共134页，星期六，2024年，5月*第103页,共134页，星期六，2024年，5月(十)丰产性改良1、RuBP羧化酶Rubisco基因改良：提高二氧化碳的羧化效率，提高光合，进而提高产量2、磷酸烯醇