OD值的测定_原创精品文档.pdfVIP

丹青不知老将至，贫贱于我如浮云。——杜甫

OD值的测定

根据测OD时光的波长，波长在紫外范围就能够测，如果不在，就不能

测量。

非常感谢细履平沙.哪位能说的具体一点啊,我想测枯草芽孢杆菌的OD,

我不太知道是在多少nm下测,我看过一些文献,上面说细菌大概600nm,

还是我自己摸索吸收波长啊?另外是测吸光度还是透光率啊,空白用培养

基做吗.

请高人指点,谢谢了.

一般测菌体密度的OD的波长范围是580nm-660nm

我们哪会儿测的(枯草芽孢杆菌)用600nm,已经属于可见光区

空白如用水做,需要离心洗涤菌体,

空白如用不接种的培养基做就不需要洗涤,但是不接种的培养基要和接

种的同时培养,以求条件一致

最后注意如果OD大于2.0,一般要稀释后再测,因为OD太大了,分光光度

计的灵敏度就会显著降低

一般都测吸光值，而且最好是整个实验过程中，保持发酵液或菌体的稀

释倍数一致，吸光值与稀释倍数不一定成正比，可保证整个实验点有可

比性

一般OD值在控制在0.1-0.4最好，在这个区内的值就可靠，最好不要

超过1.0

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OD值的测定

取值的时候要连续读数，重复3次的数最好。

测菌体密度的OD的波长可以自己摸出来，看看用哪个波长有最大吸收

就可以了。

有合适的现场用的分光光度计推荐吗？要求只用作菌浓的OD值测定，

哪种最便宜的分光光度计可以选择？

DNA合成常见问题及解答

Q:怎样对合成DNA制品进行定量?

A:DNA的量与260nm处的吸光度值（OD值）成正比，因此使用紫外

分光光度计定量是最科学的。1个OD值的合成DNA的重量约为33mg。

Q:怎样理解测定的OD值?

A:进行OD值测定时，分光光度计上显示的数值为每毫升溶液中的OD

值。当测定200ml溶液中的OD值为1.5时，溶液整体的OD量应该为

多少？此时的OD值

=1.5OD/ml×0.2l=0.3OD。

Q:合成OligoDNA应怎样保存?

A:保存合成的Oligo应该注意以下几点：

1.干燥制品很稳定，常温下数个月无问题。但为保证万无一失，放置于

-20℃保存为好。

2.溶解后的溶液DNA短期内（1-2周）使用可放置在4℃下保存，长期

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OD值的测定

保存请放置于-20℃。溶解DNA时，请注意使用无菌、无核酸酶的水或

TEBuffer。

3.荧光标记引物请避光保存。

Q:合成DNA溶液在室温下放置了数天，还可以使用吗?

A:溶液中的OligoDNA常温下数天（3-4天）应该没问题，但最好不

要放置一个星期以上。其寿命受溶液中的菌体、核酸酶等的影响。

Q:制品溶解后发现有少许沉淀，会影响实验结果吗?

A:所有的制品纯化后都要进行脱盐，脱盐是使用C18柱进行的，偶而

会有微量的树脂溢出而进入制品。树脂不影响任何反应结果，请稍许离