7N9亚型禽流感病毒HA和NA基因全长序列扩增及编制说明.pdf

DB52

贵州省地方标准

DB52/TXXXX-2021

H7N9亚型禽流感病毒HA和NA基因全

长序列扩增技术操作规程

Full-lengthsequenceamplificationofHAandNAgenesofavian

influenzaA(H7N9)virus

(征求意见稿)

2021-xx-xx发布2021-xx–xx实施

贵州省市场监督管理局发布

1

目次

目次2

前言3

1范围4

2规范性引用文件4

3术语和定义4

4缩略词5

5实验室条件5

6试剂与耗材6

7操作流程6

8结果判定9

9检测流程10

附录A（规范性附录）相关试剂的配制11

附录B（规范性附录）检测扩增引物12

附录C（资料性附录）关键氨基酸位点13

参考文献14

2

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》

的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责

任。

本文件由贵州省卫生健康委员会提出并归口。

本文件起草单位：贵州省疾病预防控制中心、贵州中医药大学、贵阳市疾病预防控制中

心、黔东南州疾病预防控制中心。

本文件的主要起草人：万永虎、郑勤妮、张德著、庄丽、任丽娟、蒋维佳、雷明玉、杨

桃梅、张富敏、徐国红、曾怡、刘小华、江忠晶。

3

H7N9亚型禽流感病毒HA和NA基因全长序列扩增技术

操作规程

1范围

本文件规定了H7N9亚型禽流感病毒特异性RT-PCR(ReverseTranscription-Polymerase

ChainReaction，反转录-聚合酶链式反应)扩增检测血凝素基因和神经氨酸酶基因全长序列

技术方法。

本文件适用于人的分泌物、活禽及其产品的擦拭子中H7N9亚型禽流感病毒血凝素基因

和神经氨酸酶基因的扩增检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日

期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包

括所有修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫

GB/T18936高致病性禽流感诊断技术

NY/T765高致病性禽流感样品采集、保存及运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

H7N9亚型禽流感病毒H7N9subtypeavianinfluenzavirus

H7N9型禽流感是一种新型禽流感，人感染H7N9禽流感的潜伏期一般为7天以内。患者

一般表现为流感样症状，如发热、咳嗽、少痰，可伴有头痛、肌肉酸痛和全身不适。重症患

者病情发展迅速，表现