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药学谢张悦怿夏.pptx

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药学121夏张悦怿PullDown

Introduction文献名称:Chemicaltaggingofadrugtargetusing5-sulfonyltetrazole作者:SatsukiOtsuki;ShinichiNishimura;HisaeTakabatake;KozueNakajima;YasuakiTakasu;ToruYagura;YukiSakai;AkiraHattori;HideakiKakeya杂志:BioorganicMedicinalChemistryLetters发表时间:2013Vol.23No.61608-1611IF:2013:2.331;2012:2.338;2011:2.554;2010:2.661SCI分区:3区

Searching百链关键词:smallmolecule选择文献在结果中搜索:targetidentification

WhatCsA(环孢素A)Probes(CsA,免疫抑制剂)PullDown亲环素A(CyPA),广泛存在于多种组织和细胞,具有肽基脯氨酰顺反异构酶(PHase)活性,在一系列生物学过程中发挥重要功能,如蛋白折叠、免疫抑制、与CD147相互作用以及细胞凋亡等。近年来研究发现,CypA与一些肿瘤的发生发展存在密切联系,特别是与肺癌、胰腺癌和肝癌等。

HowCsA5-sulfonyltetrazolebiotin(Probe)诱饵分子+捕获蛋白(靶标)alysateofJurkatcell(细胞裂解液)streptavidinbeads(链霉珠)诱饵分子与链霉珠→→亲和支持物CsAprobe从细胞裂解液中把和它有亲和力的蛋白捕获在链霉珠上,辅助:5--磺酰四唑受到靶标中亲核试剂攻击共价结合靶标活性位点,增强探针与靶标蛋白作用混合孵育SDS—PAGE(鉴定纯化)收集洗脱CyPA(Westernblotting)

How18kDaProbeSDS—PAGE

Why诱导蛋白在带有标签和被固化时仍可行使功能(CsA,5—磺酰四唑保留原有生物学活性以高亲和力与CyPA结合)5—磺酰四唑中6价S,反应活性高,易受亲和试剂攻击与之共价结合所以,捕获蛋白可以结合到亲和支持物上缓冲液及样品条件与靶结合相互作用兼容制成探针,原有生物学活性被保留生物素有效标记,使探针与链霉素生成亲和物有助于靶标蛋白捕获

Others小分子蛋白质IdentificationofDirectProteinTargetsofSmallMoleculesACSChemicalBiology2011Vol.6No.1蛋白质蛋白质Galectin-1isaninteractiveproteinofselenoproteinminthebrain.InternationalJournalofMolecularSciences2013Vol.14No.11靶标发现IdentificationandValidationofCryptochromeInhibitorsThatModulatetheMolecularCircadianClock2011Vol.6No.1

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