原创力文档- 1、本文档共35页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
如皋黄鸡CEBPA基因克隆、生物信息学分析及表达载体构建
目录
一、项目背景及研究目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．2
项目背景介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．2
研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
二、实验材料及方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
1.1如皋黄鸡样本采集．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
1.2其他实验试剂与工具．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
2.1CEBPA基因克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
2.2生物信息学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
2.3表达载体构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
三、CEBPA基因克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
基因序列获取及分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
1.1基因组DNA提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
1.2CEBPA基因序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
1.3引物设计及合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
PCR扩增及产物鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
2.1PCR扩增反应体系建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
2.2扩增产物电泳检测及纯化回收．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
四、生物信息学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
序列比对及多态性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
1.1与已知序列比对．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
1.2多态性位点分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
进化树构建及遗传分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
2.1进化树构建方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
2.2遗传多样性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
五、表达载体构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
表达载体选择及改造．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
1.1表达载体介绍及选择依据．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
1.2载体改造及酶切位点设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
重组表达载体构建及鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
2.1重组表达载体构建流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
2.2重组子鉴定及序列分析验证表达载体正确性．．．．．．．．．．．．．．．．38
一、项目背景及研究目的
如皋黄鸡是中国著名的优良地方鸡种之一，以其肉质鲜美、营养价值高而闻名。为了深入理解如皋黄鸡的遗传特性及其与健康和肉质品质相关的基因表达机制，本研究旨在通过CEBPA基因的克隆、生物信息学分析以及构建表达载体，以期为如皋黄鸡的遗传改良提供科学依据和技术支持。
CEBPA（CCAAT/增强子结合蛋白α）是一种转录因子，它在多种细胞类型中起着重要的调控作用，参与了细胞分化、生长和代谢等多种生物学过程。在人类中，CEBPA基因突变与多种疾病有关，包括某些类型的白血病。因此，了解CEBPA在如皋
文档评论（0）