浙江专版2025版高考生物一轮复习第33讲克隆技术教案.docVIP

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第33讲克隆技术

考点克隆技术

一、植物的克隆

1.植物克隆

(1)技术基础：植物组织培育

(2)理论基础：植物细胞的全能性——缘由：植物体的每个生活细胞都具有完整的全套遗传物质。

(3)植物细胞的全能性的实现条件：离体；适当的养分(包括水、无机盐、维生素、蔗糖、氨基酸等)；相宜条件(无菌、温度、湿度、光照等)以及生长调整物质。

(4)植物激素的作用：诱导愈伤组织的形成和生长；诱导和限制再分化过程。

2.植物组织培育

(1)程序：半固体培育基的配制→小组织块的切取→愈伤组织的获得→新植株的再生。

(2)填写基本操作过程图：

eq\x(外植体)eq\o(――→,\s\up7(①))eq\x(A)eq\o(――→,\s\up7(②))eq\x(B)―→eq\x(植物体)

图中①脱分化，②再分化，A表示愈伤组织，B表示胚状体或丛状苗。

3.植物细胞培育和器官培育

(1)植物细胞培育程序：愈伤组织→用摇床进行液体悬浮培育→单个胚性细胞→在相宜培育基中培育→细胞团→球形胚→心形胚→胚状体→完整植株。

(2)器官发生和形态建成的实现：通过平衡的植物激素配比进行调控。如适量的生长素和细胞分裂素配比，可诱导芽的分化；适量的吲哚乙酸及适当减除其他某些激素，可诱导生根。

4.原生质体培育与植物细胞工程

(1)原生质体的获得方法：在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液环境(较高渗透压)下，用纤维素酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培育细胞，除去细胞壁，获得球形的原生质体。

(2)植物细胞工程的操作过程

外源遗传物质eq\o(――→,\s\up7(基因工程技术),\s\do5(导入受体细胞))转基因细胞eq\o(――→,\s\up7(培育))新植株

5.植物克隆技术的应用

(1)实现工厂化的植物快速繁殖

(2)生产脱毒苗，复原品种的性状

(3)生产重要的次生代谢产物，如药物、色素、香料、杀虫剂等

(4)育种(植物细胞工程)：转基因作物，突变体选择，单倍体育种

二、动物的克隆

1.动物细胞、组织培育

(1)动物克隆的技术基础是动物的细胞和组织培育。

(2)动物(成纤维)细胞培育的过程：

(3)动物细胞培育必需传代的缘由：细胞培育到确定时期，细胞会因为密度过大造成接触抑制，或者因为代谢消耗引起养分枯竭，不能正常生长。

(4)原代培育和传代培育的含义

①原代培育：从机体取出后马上进行的细胞、组织培育的过程。

②传代培育：将原代培育细胞分成若干份，接种到若干份培育基中，使其接着生长、增殖。

2.细胞系和细胞株

(1)细胞系：是指可连续传代的细胞，可分为连续细胞系(恶性细胞系：具有异体致瘤性；“良性”细胞系：保留接触抑制现象，不致癌)和有限细胞系。

(2)细胞株：通过确定的选择或纯化方法，从原代培育物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞。可分为连续细胞株和有限细胞株。

3.克隆培育法

(1)概念：把一个单细胞从群体中分别出来单独培育，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。单抗细胞株等都是应用克隆培育法建立的。

(2)基本要求：必需确定所建成的克隆来源于单个细胞。

(3)提高细胞克隆形成率的措施有：①选择相宜的培育基；②添加血清；③以滋养细胞支持生长；④激素刺激；⑤运用CO2培育箱；⑥调整pH。

4.动物的克隆繁殖

(1)动物难以克隆的根本缘由是体细胞中基因选择性表达，细胞质中存在调整因子。

(2)细胞核移植试验和动物的克隆繁殖

(3)动物体细胞核胜利克隆的缘由：去除了核基因表达的限制。“多莉”诞生说明：动物体细胞核仍能表现全能性；胚胎和个体发育中，细胞质具有调控作用

5.单克隆抗体

(1)制备过程：

(2)单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高。

1.(2015·10月浙江选考节选)科研人员拟将已知的花色基因(目的基因)转入矮牵牛的核基因组中，培育新花色的矮牵牛。请回答：

将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调整剂的MS培育基(含蔗糖、琼脂和抗生素，下同)上，使小叶先脱分化形成________。再将其转移至另一培育基诱导形成芽，芽切割后转移至________(A.LB培育基B.MS培育基＋相宜浓度NAAC.MS培育基＋相宜浓度BAD.NAA/BA小于1的MS培育基)上生根，形成完整植株。

解析组培时，先将处理后的外植体接种在适当的培育基上，先经脱分化形成愈伤组织。再将其转移至另一培育基诱导生芽形成的丛状苗，丛状苗经分别后转移至添加相宜浓度NAA的MS培育基上生根，形成完整植株。留意生根培育基中生长素类物质浓度需大于细胞分裂素类。

答案愈伤组织B

2.(2024·4月浙江选考节选)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程