浙江专版2024_2025学年高中生物第二章第二节动物的克隆教学案浙科版选修3.docVIP

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其次节动物的克隆

1.动物克隆的技术基础主要是动物细胞与组织培育。2.动物细胞培育的过程：

1.动物克隆的技术基础主要是动物细胞与组织培育。

2.动物细胞培育的过程：

eq\x(\a\al(动物,组织块))eq\o(――→,\s\up7(剪碎),\s\do5(用胰蛋白酶处理))eq\x(\a\al(单个,细胞))eq\o(――→,\s\up7(加培育液),\s\do5())eq\x(\a\al(细胞,悬液))―→eq\x(\a\al(原代,培育))―→eq\x(\a\al(传代,培育))

3.动物细胞培育的原理是细胞增殖。

4.动物细胞培育一般选用胚胎或幼龄动物的组织，细胞在培育过程中会出现细胞贴壁(生长)和细胞的接触抑制现象。

5.原代培育物在首次传代时就成为细胞系；通过肯定的选择或纯化方法，从原代培育物或细胞系中获得的具有特别性质的细胞，称为细胞株。

6.把一个细胞从群体中分别出来培育，使之繁殖成一个新的细胞群体的技术称为克隆培育法。

一、动物细胞的培育和克隆形成

1．动物细胞的培育

(1)过程(填图)：

(2)培育瓶内细胞生长特点：

①贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁生长。

②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。

(3)原代培育与传代培育：

①原代培育：从机体取出后马上进行的细胞或组织培育为原代细胞。

②传代培育：将原代细胞从培育瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培育瓶中接着培育(10代以外的培育)。

2．细胞系和细胞株

(1)细胞系：可连续传代的细胞。原代培育物在首次传代时就成为细胞系，能连续培育下去的细胞系称为连续细胞系，不能连续培育下去的细胞系称为有限细胞系。二倍体细胞通常为有限细胞系。连续细胞系被认为是发生转化了的细胞系，大多数具有异倍体核型。有的连续细胞系是恶性细胞系，具有异体致瘤性；有的连续细胞系获得了不死性，但保留接触抑制现象，不致癌。

(2)细胞株：通过肯定的选择或纯化方法，从原代培育物或细胞系中获得的具有特别性质的细胞称为细胞株。细胞株一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等。可以连续多次传代的细胞株称为连续细胞株，传代次数有限的细胞株称为有限细胞株。

3．克隆培育法

(1)概念：把一个单细胞从群体中分别出来单独培育，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，也称为细胞克隆。

(2)特点：由于来源于一个共同的祖细胞，所以称为纯系，也就是克隆。

(3)提高细胞克隆形成率的措施：选择相宜的培育基、添加血清(胎牛血清最好)、以滋养细胞支持生长、激素(胰岛素等)刺激、运用CO2培育箱、调整pH等。

二、动物的细胞融合技术及其应用

1．细胞融合

(1)概念：是指在肯定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。

(2)原理：细胞膜的流淌性。

(3)诱导融合的方法：

①物理方法和化学方法：电激法、聚乙二醇等。

②生物方法：灭活的病毒(如仙台病毒)。

2．细胞杂交

(1)概念：基因型不同的细胞间的融合称为细胞杂交。

(2)过程：

(3)应用：由于细胞杂交中染色体简单丢失，利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物(蛋白质)削减的对应关系可以进行基因定位。

3．杂交瘤技术和单克隆抗体的制备

(1)制备过程：

①用外界抗原刺激烈物，使其发生免疫反应，使B淋巴细胞产生抗体。

②利用仙台病毒或聚乙二醇等作介导，使经免疫的动物的脾细胞与可以无限传代的骨髓瘤细胞融合。

③经过筛选、克隆培育，获得来自单一细胞的既能产生特异抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞克隆。

(2)杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大优点：可以从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中提取单抗。

(3)单抗的运用：可作为特异探针，探讨相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。

三、动物的克隆繁殖

1．动物细胞全能性

(1)动物细胞的分化被认为不行逆的，在动物发育过程中，细胞的发育潜能渐渐变窄。

(2)全能性大小：

①受精卵＞多能胚胎细胞＞单能干细胞＞高度分化的体细胞。

②低等动物细胞＞高等动物细胞。

2．动物体细胞克隆

3．动物难以克隆的根本缘由

在动物的个体发育过程中，细胞分化使得细胞发生了基因的差异表达，细胞基因组中基因的活动很不完全。

1．动物细胞培育过程的依次是()

①原代培育②传代培育③胰蛋白酶处理组织，形成单个细胞，制成细胞悬液

A．①②③ B．①③②

C．②①③ D．③①②

解析：选D动物细胞培育是用动物胚胎或幼龄动物器官通过胰蛋白酶处理制成细胞悬液，再通过原代培育和传代培育得到细胞株。

2．进行动物细胞培育时，最好选用的培育材料是()

A．苍老的动物组织细胞

B．成熟动物个体的体细胞

C．动物的受精卵

D．动物胚