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猪血清IgG的分离纯化及鉴定ppt课件.pptxVIP

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猪血清IgG的分离纯化及鉴定;Contents;一、材料与方法;2、主要试剂;试剂名称;3、仪器设备;2、猪血清IgG的纯化;;3、提取液蛋白含量测定——Folin-酚法;4、猪血清IgG分子量测定——SDS;电泳设备;二、结果与讨论;保留时间0-1.6h为缓冲液A洗脱第一峰;

1.6h开启缓冲液A-C线性梯度洗脱,获得第二峰;

图示两色谱峰分离效果较好,分辨率高,无重叠。;;分别将低盐峰和高盐峰样品吸光度代入蛋白质标准曲线,计算求得低盐峰样品蛋白质含量1.45mg/mL,高盐峰样品蛋白质含量为1.74mg/mL。;(四)SDS测IgG分子量结果;IgG样品经预处理过程中巯基乙醇的作用而打开二硫键,还原成两条单链,再进一步与SDS结合成带大量负电荷的SDS-蛋白复合物,SDS电泳呈现两条较浓的条带。

猪血清球蛋白经正辛酸法提取,DEAE纯化后,所得IgG较纯净,基本无其它杂蛋白,表明该提取纯化工艺能得到较纯净的免疫球蛋白。;1、标准曲线制作;2、IgG样品分子量测定结果;四、总结与感想;这种以学生为主,老师为辅的实验课程让我们想得更多,学得更多,得到的也更多。在我们开展讨论的过程中,同学们互相学习,对实验的设计流程有了深刻的认识。实验其间,对于细节上的问题我们更加耐心,为将来毕业论文的开展提供了有力的基础。

;谢谢

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