优质课动物细胞融合与单克隆抗体用.pptVIP

专题2细胞工程动物细胞融合与单克隆抗体学习目标说出动物细胞融合的原理、过程和意义。理解单克隆抗体制备的过程和应用植物体细胞杂交过程示意图0102(1)(2)03(3)阅读课本P52及识图2-23，找出动物细胞融合的概念、过程、意义、和最主要的用途。01020304A细胞人工诱导杂交细胞B细胞1动物细胞融合的概念动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞结合形成一个单核细胞的过程。0506一、动物细胞融合1.2动物细胞融合过程细胞膜的流动性1灭活病毒、PEG、电激等2融合后的细胞进行有丝分裂，形成两个完整的杂交细胞3诱导的手段？4融合后细胞的类型？5AB杂种细胞遗传物质有什么特点？6三种AA、AB、BB（A、B）7含两种生物的遗传物质8原理？91.2动物细胞融合过程为什么灭活的病毒能作诱导剂？保留融合活性灭活丧失感染性010203仙台病毒紫外线灭活丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）①什么是病毒的灭活？②灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？3动物细胞融合技术的意义和应用细胞膜的流动性细胞的全能性细胞膜的流动性纤维素酶、果胶酶胰蛋白酶物理方法（离心、振荡、电激）化学方法（PEG）物理、化学方法生物法（灭活的病毒）获得杂种植株制备单克隆抗体去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合1.4比较动、植物细胞杂交技术初试牛刀【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）A.离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（）具有原来两个或多个细胞的遗传信息B.能无限增殖C.可形成新个体D.培养过程会贴壁【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（）A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞BBA二、单克隆抗体强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。B淋巴细胞效应B淋巴细胞（浆细胞）记忆B淋巴细胞分化抗体的传统生产方法抗原反复注射动物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。如何解决这个问题呢？单克隆抗体！读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念12单克隆抗体：通过动物细胞融合技术获得的杂交瘤细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体3人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。2.1单克隆抗体的概念提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？01提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？02问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。032单克隆抗体的制备04一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞1975年英国科学家米尔斯坦和科勒的实验1为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？2会有几种融合方式？3杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？4是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？5如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能快速大量增殖。单克隆抗体的制备1、怎样筛选出杂交瘤细胞？2、筛选出的杂交瘤细胞产生的抗体都一样吗？3、怎样获得只产生特异性抗体的杂交瘤细胞？4、怎样获得大量的单一抗体？利用选择培养基培养，筛选否用多孔细胞培养板培养，稀释度要保证每个孔内不多于一个细胞。抗原抗体杂交法检测——呈阳性反应体内或体外大量培养特异的杂交瘤细胞，从中提取单一抗体。你学会了吗？单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？3单克隆抗体的应用诊断试剂——最广泛应用准确、高效、