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第二章-植物组织与细胞培养技术(2014-10)幻灯片PPT课件.pptxVIP

第二章-植物组织与细胞培养技术(2014-10)幻灯片PPT课件.pptx

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第二章植物组织与细胞培养技术;第一节基础知识第二节组织培;组织培养与细胞培养的区别:组织;第一节基础知识Clon;Planttissuecu;Callus(plCall;Embryoid(胚状体):;Artificial/Synt;优点:(1)难以保存的种质资源;人工种子存在的问题①许多重要植;茎尖分生组织培养再生植株Sho;病毒检测;无标题;脱毒苗的繁殖;无标题;一个植物细胞向分生状态回复过程;无标题;第二类;第三类;根据细胞类型不同从强到弱:;外植体脱分化个体再生再分化细胞;细胞脱分化1、脱分化(Dedi;(1)损伤。切割损伤的刺激,促;诱导期:是细胞准备分裂的时期。;黄瓜子房组织经脱分化形成胚性愈;细胞再分化(rediffere;无标题;§1实验室设计与设备§2;实验室设计原则:保证无菌操作,;基本的工艺流程:容器具洗涤,物;标准的组培实验室洗涤室、准备室;无标题;灭菌设备:高压蒸气灭菌锅用于培;注意事项:①对高压灭菌后不变质;(2).接种设备:无菌超净工作;酒精灯封口膜接种器具培养瓶;(3).培养设备①带日光灯的培;无标题;②恒温箱:又称培养箱,可用于原;③摇床:在液体培养基中,可改善;(4).驯化设备①温室;(5)、其它辅助设备①培养基灌;②烘箱:用于干燥洗净后的玻璃器;④天平和显微镜:天平包括分析天;⑤纯水机与蒸馏水发生器:是实验;⑥酸度计:用于校正培养基和酶制;⑦显微镜包括解剖镜,生物显微镜;除湿机:使培养室的湿度保持在定;实验基本操作;灭菌工作是极其重要的有菌和无菌;1、物理方法:干热、湿热、过滤;适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌;适用于各种器皿、培养基、器皿、;培养基的灭菌一般用高压高温处理;主要是利用紫外灯进行照射,适合;用火焰灼烧达到灭菌目的,适用于;适用外植体、实验器皿、操作表面;长期不用的培养室或接种室要进行;人为因素(工作人员本身):工作;接种操作应在近火焰处进行,且动;接种过程中尽可能达到悬空要求防;接种时不得用手接触瓶盖内壁或瓶;瓶盖朝上放,接种完毕后立即盖好;培养基及其配制培养基(cult;一.培养基成分主要为:水无机盐;1.水水是植物体的重要组成成分;2.无机盐类(inorgani;大量元素指植物所需元素的浓度大;微量元素浓度小于0.5mmol;3.有机化合物(organic;(2)维生素明显的促进离体;(5)天然复合物(包括部分蛋;椰乳使用最多、效果;4、生长调节物质(植物激素);(1)生长素类(auxin);IAA--天然生长素,亦可人工;腺嘌吟的衍生物,包括6-BA、;激素配比模式生长素/;(3)赤霉素(gibberel;Growthmediumi;No6-BA?6-BAre;NAAincreasedt;5.其它附加成分(1)琼脂(a;常用培养基的种类、配方及特点1;MS培养基(Murashig;无标题;无标题;培养基的配制1、母液的配制和保;注意事项浓度高耐贮存,但准确度;(1)大量元素可以混在一起配;(3)铁盐硫酸亚铁和EDTA;(5)激素每种单独;2、培养基的配制及灭菌培养基配;一、外植体的选择在植株生长的最;二、外植体的灭菌外植体选取;(2)将培养基放入超净工作台内;接种茎段:注意形态学下端插入培;外植体的培养主要因素:光照、温;3、湿度培养瓶内相对湿度常;种子和分生组织:培养时通常将其;(1)遗传因素(2)取材部位(;培养中常见问题(一)污染;无标题;2、污染的预防措施(1)防止材;⑶器皿与金属器械的灭菌玻璃器皿;(二)褐变基因型外植体的生理状;⑴选择适宜的外植体及最佳培养基;(三)玻璃化(Vitrific;⑴激素:细胞分裂素浓度、比例过;提高蔗糖和琼脂浓度(提高渗透势;试管苗的驯化与移栽一、试管苗的;⑵高湿瓶内相对湿度接近100%;⑴试管苗生长细弱、茎叶表面角质;试管苗的驯化1、目的提高试管苗;3、驯化方法(炼苗)培养室培养;试管苗的移栽将试管苗从培养瓶;1、壮苗移栽2、生长素(NAA;移栽后管理①土壤要保持疏松,;试管苗→→炼苗→→取苗→→洗净;第三节植物器官的培养;外植体形成完整植株的途径(一);(二)外植体-胚状体-植株。1;外植体愈伤组织脱分化再分化体细;植物再生的类型器官发生型(or;器官发生型:诱导器官外植体产生;胚状体发生型:指植物器官、组织;器官型指直接从茎、叶、鳞片等外;原球茎型(protocorm;鳞茎型鳞片近轴面或边缘直接形;孢子型用成熟或未成熟的孢子进;微枝扦插型带芽的小插条在试管;植物器官培养营养器官;一、离体根的培养离体根生长要求;营养器官的培养——根的培养;大蒜根尖培养及植株再生;植物器官的培养二、

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