原创力文档- 1、本文档共10页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
免疫细胞的分离**免疫细胞的分离免疫细胞**免疫细胞的分离直接参与免疫应答及与免疫应答相关的所有细胞。概念1单核吞噬细胞系统：单核细胞/巨噬细胞树突状细胞（DCs)淋巴细胞系统：T淋巴细胞（Th/Tc)B淋巴细胞NK细胞粒细胞系统:中性粒细胞噬酸性粒细胞噬碱性粒细胞分类2免疫细胞的分离**免疫细胞的分离人外周血单个核细胞的分离01淋巴细胞的分离02免疫细胞亚群的分离03细胞分离原理**免疫细胞的分离1细胞的大小和比重3细胞黏附于各种物质表面的特性2细胞表面标志人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC):Monocyte、Lymphocyte。原理：血液中各细胞成分的比重不同，经离心沉淀，即可在分层液与血浆之间获得比较纯的单个核细胞，其中淋巴细胞占90%以上。人外周血单个核细胞的分离
——Ficoll分层离心法不同细胞密度不同红细胞和多形核白细胞1.092
单个核细胞1.070
分层液1.077人外周血单个核细胞的分离
——Ficoll分层离心法
Ficoll分层液：蔗糖聚合物+泛影葡胺，密度1.077+0.001g/L。二、淋巴细胞的分离**免疫细胞的分离E花环分离法贰尼龙棉柱法壹补体细胞毒法免疫荧光法叁二、淋巴细胞的分离
——尼龙棉柱法1原理：B细胞和单核细胞具有易黏附的特性，将淋巴细胞悬液加至尼龙纤维柱上，37℃作用1~2h后，洗脱的为非黏附性的T细胞。2PBMC3尼龙纤维棉柱4B细胞单核细胞5T细胞二、淋巴细胞的分离
—E花环分离法（纯化T细胞）成熟T细胞表面有绵羊红细胞受体（E受体，CD2分子），可和SRBC形成E花环，B细胞则无。E花环比重大，沉淀，经分离液分离来。E花环周围的绵羊RBC可用低渗法除去。原理三、免疫细胞亚群的分离**免疫细胞的分离免疫磁珠分离法01流式细胞术02三、免疫细胞亚群的分离
—免疫磁珠分离法原理：将抗体交联于磁珠表面形成免疫磁珠（Immunomagneticbead，IMB），免疫磁珠直接或者间接偶联在抗体上，从而与细胞相连，在高强度、梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的。免疫细胞亚群的分离
—免疫磁珠分离法第二抗体+磁性微粒第一抗体+细胞特定细胞间接法：直接法：抗细胞表面分子抗体+磁性微球免疫磁珠+细胞悬液与免疫磁珠结合的细胞免疫磁珠法分选装置
文档评论（0）