大豆种子活力相关性状的遗传解析及GmIAGLU的功能研究.pdfVIP

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摘要I

ABSTRACTIII

缩略词表VII

第一章文献综述1

1.1种子活力的研究进展1

1.1.1种子活力的定义1

1.1.2影响种子活力因素2

1.1.3种子活力的评价和测定4

1.1.4种子活力遗传研究4

1.1.5种子活力相关的QTL研究5

1.2糖基转移酶研究进展6

1.2.1植物糖基转移酶的生物功能6

1.2.2激素糖基化影响种子活力8

1.3本研究的目的及意义8

第二章大豆萌发期种子活力相关性状的连锁分析11

2.1材料与方法11

2.1.1试验材料11

2.1.2试验设计11

2.1.3萌发性状调查12

2.1.4Bin标记12

2.1.5表型分析12

2.1.6连锁分析12

2.1.7转录组分析12

2.2结果分析13

2.2.1种子萌发相关性状表型数据分析13

2.2.2萌发期种子活力性状相关分析15

2.2.3萌发期种子活力性状的连锁分析15

2.2.4大豆种子活力候选基因19

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大豆种子活力相关性状的遗传解析及GmIAGLU的功能研究

2.3讨论21

第三章GmIAGLU基因的克隆及功能验证23

3.1材料与方法23

3.1.1试验材料23

3.1.2载体与菌株23

3.1.3试剂24

3.1.4引物合成和测序24

3.1.5大豆核酸的提取及cDNA第一链的合成24

3.1.6生物信息学分析26

3.1.7基因表达水平的测定26

3.1.8大豆萌发期激素诱导GmIAGLU的表达模式分析27

3.1.9GmIAGLU关联分析及单倍型分析27

3.1.10基因克隆和载体的构建25

3.1.11亚细胞定位试验方法28

3.1.12pBT3-GmIAGLU自激活检测和功能检测28

3.2结果与分析29

3.2.1GmIAGLU生物信息学分析29

3.2.2GmIAGLU单倍型分析33

3.2.3组织表达分析及诱导表达分析34

3.2.4亚细胞定位36

3.2.5膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒pBT3-GmIAGLU的鉴定36

3.2.6pBT3-GmIAGLU自激活检测和功能检测37

3.3讨论38

第四章GmIAGLU转基因大豆41

4.1材料和方法42

4.1.1试验材料42

4.1.2载体和菌株42

4.1.3载体构建42

4.1.4大豆子叶节的遗传转化42

4.1.5转基因植株的分子生物学检测42

4.1.6转基因植株相关基因的表达分析43

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4.2结果分析43

4.2.1大豆子叶节的遗传转化43

4.2.2GmIAGLU转基因大豆植株分子生物学检测45

4.2.3T代转基因植株GmIAGLU基因的表达分析46

1

4.3讨论47

全文总结49

本研究创新之处51

参考文献53

附录63

攻读硕士学位期间发表的学术论文