《布鲁氏菌A19疫苗株鉴定荧光定量PCR检测方法》征求意见稿.pdf

ICS

备案号：

团体标准

MA

T/CVMAXXXXX—XXXX

布鲁氏菌A19疫苗株鉴定荧光定量

PCR检测方法

e

Ral-TimePCRforIdentificato

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征求意见稿）

（

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国兽医协会发布

XX/TXXXXX—XXXX

布鲁氏菌A19疫苗株鉴定荧光定量PCR检测方法

1范围

本文件规定了布鲁氏菌A19疫苗株鉴定荧光定量PCR检测方法。

适结、流产物、环境样品等本中布鲁氏菌A19疫

本文件用于动物血液样品、脾脏、肝脏、淋巴样

苗株的核酸进行鉴别诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

4试验方法标准

04-2015标准编写规则第部分：

GB/T2001.

GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断标准

N/T1

Y467奶牛布鲁氏菌病PC诊断技

R术

剂与

3试耗材

3.1提取试剂

宜选取商品化的细菌基因组DNA提取试剂盒。

3.2荧光定量PCR扩增试剂

宜按照不同的荧光定量PCR平台的说明书选取推荐的荧光定量PCR扩增试剂。

3.3引物探针

布鲁氏菌通检上游引物(BuF)：5＇-CGCTCGCGCGGTGGAT-3＇

布鲁氏菌通检下游引物(BruR)：5＇-CTTGAAGCTTGCGGACAGTCACC-3＇

1

XX/TXXXXX—XXXX

布鲁氏菌通检探针(BruP)：5＇-FAM-ACGACCAAGCTGCATGCTGTTGTCGATG-BHQ1-3＇

游引(A19F)：5＇-CGCGGGCTTCCTGATG-3＇

A19鉴定上物

A19鉴定下游引物(A19R)：5＇-GGCCCAGACCGGGAAATA-3＇

A19鉴定探针(A19P)：5＇-VIC-ACCTTGCAGGAATTCGGCATCATCC-BHQ1-3＇

4仪器与设备

生物安全柜、分析天平、水浴锅、高速离心机、荧光PCR仪、组织研磨器、-20℃冰箱、涡旋震荡

仪。

5操作步骤

5.1样品的采集及运输

按照GB/T18646和NY/T1467执行。