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公开课讲课用微生物的实验室培养标准资料

CATALOGUE目录微生物实验室培养概述微生物实验室常用设备微生物实验室培养方法微生物实验室培养操作规范微生物实验室培养注意事项微生物实验室培养应用实例

01微生物实验室培养概述

研究微生物的生理生化特性分离和纯化微生物获得大量的微生物细胞或代谢产物用于微生物分类鉴定、育种、发酵等研养目的与意义

固体培养液体培养厌氧培养需氧培养培养类型与特固体培养基上培养微生物，形成菌落，便于分离和纯化。在液体培养基中培养微生物，适用于大规模培养和工业生产。在无氧或低氧环境下培养厌氧或兼性厌氧微生物。在有氧环境下培养好氧微生物。

在无菌条件下进行接种和培养，避免杂菌污染。无菌操作适宜的营养和环境条件定期观察和记录安全防护提供适合微生物生长的营养物质和环境条件，如温度、pH、渗透压等。定期观察微生物的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。注意实验室安全，采取必要的防护措施，如穿戴实验服、戴手套和口罩等。培养原则与要求

02微生物实验室常用设备

提供稳定的温度环境，用于细菌、真菌等微生物的培养。恒温培养箱恒温恒湿培养箱CO2培养箱除温度外，还能控制湿度，适用于对湿度有要求的微生物培养。提供稳定的CO2浓度和温度环境，用于细胞培养等需要CO2的实验。030201培养箱

利用可见光和光学透镜成像，用于观察微生物的形态和结构。光学显微镜利用荧光物质在特定波长光激发下发出荧光的特性，观察微生物的荧光现象。荧光显微镜利用电子束成像，能够观察微生物的超微结构。电子显微镜显微镜

提供水平层流洁净空气，保护实验样品免受污染。提供垂直层流洁净空气，适用于需要较高洁净度的实验操作。超净工作台垂直层流超净工作台水平层流超净工作台

用于实验器具和培养基的灭菌处理。高压蒸汽灭菌器用于准确移取液体样品或试剂。移液器及吸头用于盛放培养基和微生物样品。培养皿、试管等玻璃器皿用于保存试剂、培养基和微生物菌种等。冰箱和冷藏柜其他辅助设备

03微生物实验室培养方法

主要用于移种纯培养物、保存菌种或观察细菌的某些特性。用接种环或接种针伸入菌种管内，挑取用来移种的菌落。伸入斜面培养管内，先从斜面底部到顶端划一条直线，然后从底部开始，将菌种在斜面上来回密集划动，使细菌数进一步增加。再用接种环在斜面的顶端密集划动，使之分布均匀，盖上瓶盖，用牛皮纸包扎好。接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上灭菌。适用范围操作方法注意事项斜面接种法

液体培养基接种法适用范围多用于一些液体生化试验管的接种。操作方法用无菌吸管吸取菌液注入液体培养基中，轻轻摇匀。注意事项接种前后，吸管应在酒精灯火焰上灭菌。

主要用于分离培养细菌或观察细菌的某些特性。适用范围用接种环在平板培养基表面通过分区划线而达到纯化分离微生物的一种方法。是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。操作方法划线时力度要适宜，避免划破培养基；划线后灼烧接种环，及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。注意事项平板划线接种法

多用于双糖、半固体、明胶等培养基的接种，方法与斜面接种类似。适用范围接种前后，接种针应在酒精灯火焰上灭菌。注意事项穿刺接种法

04微生物实验室培养操作规范

保持实验室清洁整齐，定期进行消毒处理，确保无菌操作环境。实验室环境使用已灭菌的器材和试剂，避免污染。实验器材实验前需洗手、穿戴已灭菌的工作服和手套，减少人员带菌的可能性。操作人员无菌操作规范

制备过程按照配方准确称量各成分，加热溶解后调节pH值，分装至已灭菌的容器中。培养基配方根据实验需求选择合适的培养基配方，确保微生物生长所需的营养物质。灭菌处理采用高压蒸汽灭菌或干热灭菌等方法对培养基进行灭菌处理，确保无菌状态。培养基制备规范

检查培养基是否无菌，选择合适的接种工具如接种环、吸管等。接种前准备采用划线接种、点接种、液体接种等方法进行接种，确保微生物分布均匀。接种方法接种过程中需保持无菌操作，避免其他微生物污染。无菌操作接种操作规范

温度控制湿度控制光照条件培养时间培养条件控制规范根据微生物的生长需求设置合适的培养温度，一般细菌培养温度为37℃。根据微生物的光照需求设置合适的光照条件，如避光、光照等。对于需要控制湿度的微生物培养，需设置合适的湿度条件。根据微生物的生长速度和实验需求设置合适的培养时间。

05微生物实验室培养注意事项

防止污染措施保持实验室清洁，定期消毒，减少杂菌滋生。使用无菌器材，避免交叉污染。选用高质量培养基，确保无菌无杂质。严格遵守无菌操作规范，如穿戴实验服、戴口罩和手套等。实验室环境实验器材培养基操作规范

03废弃物处理合理处理实验废弃物，避免对环境造成污染。01生物安全处理可能具有传染性的微生物时，需采取相应生物安全防护措