T GXAS 408—2022 农杆菌介导甘蔗遗传转化技术规程.pdfVIP

ICS65.020.20

CCSB30

GXAS

团体标准

T/GXAS408—2022

农杆菌介导甘蔗遗传转化技术规程

Technicalcodeofpraticeforagrobacterium-mediatedgenetic

transformationofsugarcane

2022-12-13发布2022-12-19实施

广西标准化协会发布

目次

前言II

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4设备和用具1

5试剂1

6培养基2

7无菌苗培养2

8农杆菌液准备3

9遗传转化3

10转基因苗移栽4

11目的基因检测4

前言

本文件参照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由广西壮族自治区农业科学院提出、归口并宣贯。

本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院、中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所、广

西甘蔗学会、农业部甘蔗生物技术遗传改良重点实验室。

本文件主要起草人：秦翠鲜、黄东亮、廖芬、陈忠良、汪淼、潘有强、李傲梅、周丽、陈颜、黄甜

梅。

农杆菌介导甘蔗遗传转化技术规程

1范围

本文件确立了农杆菌介导甘蔗遗传转化的程序，界定了农杆菌介导甘蔗遗传转化技术所涉及的术语

和定义，规定了设备、用具、试剂、培养基的要求，以及无菌苗培养、农杆菌液准备、遗传转化、转基

因苗移栽、目的基因检测等阶段的操作指示。

本文件适用于农杆菌介导甘蔗生长点遗传转化的操作。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

农杆菌介导agrobacterium-mediatedtransformation

在农杆菌侵染植物细胞的过程中将外源基因整合到农杆菌Ti质粒上的一段T-DNA，随后携带外源基

因的T-DNA插入到受体植物基因组中，最后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株的遗传转化方

法。

3.2

遗传转化genetictransformation

利用重组DNA技术和细胞组织培养技术将外源基因导入植物基因组中使植物获得新性状的技术。

4设备和用具

4.1设备

超净工作台、细菌培养箱、超低温冰箱(-80℃)、电热消毒器。

4.2用具

医用剪刀、医用镊子、医用手术刀、无菌滤纸、脱脂棉、培养瓶、离心管、培养皿。

5试剂

5.1除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。所有

试剂溶液宜大体积（1L）配制、小体积（10mL～100mL）分装后经高压灭菌后使用，不宜高压灭菌的

试剂通过0.22um滤膜过滤除菌。

5.2试剂：硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、碘化钾、硼酸、硫酸锰、硫酸锌、钼酸

钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、

蔗糖、琼脂、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）、萘乙酸（NAA）、6-苄基氨基嘌呤（6-BA）、利福平（Rif）、

乙