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- 2025-01-16 发布于河南
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长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。——李白
蛋白质提取与纯化技术总结
蛋白质提取与纯化技术
1.蛋白质(包括酶)的提取
大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的
蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂
提取分离和纯化蛋白质及酶。
水溶液提取法:稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度
大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,
提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效
成份性质而定。一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,
因此,温度高利于溶解,缩短提取时间。但另一方面,温度升高会使
蛋白质变性失活,因此,基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用
低温(5度以下)操作。为了避免蛋白质提以过程中的降解,可加入
蛋白水解酶抑制剂(如二异丙基氟磷酸,碘乙酸等)。
下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。
1、pH值
蛋白质,酶是具有等电点的两性电
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