微生物正交实验.ppt

有机氮源：玉米浆、豆饼粉、鱼粉、酵母浸出液等3功能：构成菌体细胞物质和代谢产物1无机氮源：氨水、铵盐、硝酸盐等2工业常用氮源硫酸盐、磷酸盐、氯化物、含钾、钙、钠、镁、铁的化合物微量元素：铜、锰、锌、钼等功能：构成菌体成分、酶的组成部分、酶的激活剂或抑制剂、调节培养渗透压、调节pH和氧化还原电位无机盐定义：凡是微生物生长不可缺少的微量有机物质，如：氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素（生物素、硫胺素）。01功能：构成细胞的组成，促进生命活动的02进行。并非必需的。提供生长因子的农副产品原料：玉米浆、麸皮水解液、糖蜜、酵母03生长因子生物素对菌体和谷氨酸积累都有影响01发酵中添加“亚适量”浓度02谷氨酸产生菌：生物素缺陷型目的：有助于调节产物的形成，大幅度提高发酵产率、降低成本。丝氨酸前体甘氨酸色氨酸前体吲哚/氨茴酸前体直接被菌体在微生物合成过程中结合到产物分子上，而其自身结构并没有多大变化，产物产量大幅度提高。前体物质活性剂等促进剂。例如：酶制剂发酵过程，添加诱导物、表面质，称为促进剂。某些对发酵起一定促进作用的物产过程中，可在发酵培养基中加入定义：在氨基酸、抗生素、酶制剂发酵生EDCBAF促进剂总之，培养基配置可参照前人的经验配方，再结合菌种和产品的特性，采用摇瓶等小发酵设备对碳、氮、无机因子等单因子逐个试验，观察这些因子对菌体生长和产物合成的影响，再综合考虑各因素的影响，以得到最优配方。为减少试验次数，可考虑用“正交试验设计”等方法确定培养基的组分和浓度。正交试验法定义：用正交表安排多因素试验与分析试验结果的办法，简称正交试验。水平：因素所处的状态因素：影响试验指标的条件简化试验次数诸因素中哪些因素对指标的影响较大，哪些因素较小。所考察的因素各取什么水平能使实验指标较好指标在不同水平时的变化规律等正交试验意义1常用的正交表2例如：L4（23），L16（44），L27（313）3正交表格式：Ln（tq）4L代表正交表，n代表实验次数，6常用的正交表可查阅有关统计学书籍直接套用。5t代表因素水平数，q代表因素数。正交表选择依据：在能容纳所研究的因素数和因素水平数的前提下选用试验次数最少的正交表来安排试验正交表安排试验注意事项：尽可能使各因素的水平数相等，试验的重复次数相当。01直观分析02方差分析正交设计试验结果分析K1：每一因素每一水平下试验指标值的总和01k1：每一因素每一水平下试验指标值的平均数02R（级差）：试验指标随因素水平变化而改变的最大范围03直观分析正交设计表表头设计考察指标：糖酸转化率（％）L16(44)正交实验正交实验结果直观分析各因素对产酸影响的大小顺序为：葡萄糖KH2PO4尿素玉米浆，1各因素的水平为：A2，B3，C2，D32由此最终确立了菌株的优化配方：葡萄糖4％；尿素1.5％；玉米浆1％；KH2PO40.5％。3实验结果分析直观分析优点：简便、计算工作量小直观分析缺点：判断因素效应的精度不够，也不能给出误差的大小。正交试验结果方差分析考察指标：糖酸转化率（％）L16(44)正交实验结果试验结果的方差分析以n表示试验的总次数，t代表A、B、C、D四因素每个水平的重复试验次数。n＝16，t＝4，方差分析的平方和QA＝（∑Ki2）/t－（∑Xi）2/n＝111818/4－6362/16＝2673.5QB＝19182/4－6362/16＝14.5QC＝101258/4－6362/16＝33.5QD＝101550/4－6362/16=106.5Q＝∑Xi2－（∑Xi）2/n＝28137.6－6362/16＝2856.4Qe＝Q－(QA+QB+QC+QD)＝28.4种子的扩大培养微生物学教研室菌种的扩大培养是发酵生产的第一道工序,该工序又称为种子制备。菌体数量增加种子制备高质量的种子种子的扩大培养任务：获得纯而壮且活力旺盛、接种数量足够的培养物。发酵时间长短和接种量的大小有关。将较多数量的成熟菌体接入发酵罐中，有利于缩短发酵时间，提高发酵罐利用率，减少染菌机会。01固体培养基上生产大量孢子的孢子制02备液