实验四(新城疫病鸡剖检及病毒学检查).ppt

新城疫病鸡剖检

及病毒学检查蒲娟E-mail:Tel:兽医传染病学实验室注意事项兽医传染病的一般诊断程序病鸡剖检及细菌学检查”一、兽医传染病学实验室注意事项213注意个人预防、避免病原传播穿着工作服，实验结束后需立即消毒清洗。实验操作期间，勿以手指或其他器物等接触口唇、眼、鼻及面部。4实验完毕，应洗手消毒后离去。危险材料及其污染的器物处理动物尸体、内脏、血液等废弃病料，以及废弃的病原培养物、生物制品等须深埋或经过严格消毒处理（焚烧、煮沸、高压灭菌等）后丢弃到公共垃圾处理场，严禁将未经消毒的危险性材料直接丢弃。用过的棉球、纱布、吸水纸等污物须置于固定容器内统一消毒处理，不得任意抛弃。桌面、地板或地面被污染时，应用适当消毒液清洗。实验室诊断病理组织学、病原学（涂片镜检、病原分离、PCR、动物回归）、血清学（HI、AGID、ELISA）等临床诊断流行病学、临床症状、病理解剖等发生疫情确诊三、病鸡剖检及病毒学检查实验目的掌握病鸡剖检的一般方法。02掌握动物病毒病实验室诊断的一般程序。01了解鸡新城疫的病理变化和临诊要点。03掌握新城疫病毒的分离鉴定。04疑似新城疫病流行病学调查尸体剖检（取样、病变的观察）病原的分离病原的鉴定做出诊断（发病时间、发病率、死亡率、发病鸡群的用药和免疫情况等）取样：病变组织（脾脏—病毒分离）、血液病变的观察：口腔、嗉囊、气管及肺、腺胃与肌胃、肠道粘膜。病毒分离：鸡胚血凝（HA）与血凝抑制（HI）试验尸体剖检外内观察取样剖检肝脾胃肠法氏囊肾脏肺心喉头、气管脑尸体剖检病鸡剖检基本原则尸体剖检全身黏膜和浆膜出血，淋巴系统肿胀、出血和坏死，以消化道和呼吸道为明显。口腔有黏液，嗉囊内积酸臭味液体和气体；腺胃黏膜水肿，其乳头或乳头间有鲜明的出血点，或有溃疡或坏死。肌胃角质层下也可见出血点。将脾脏剪碎，按照1:5的比例加入含三抗的PBS，用研磨器研磨成组织匀浆将匀浆置于1.5ml离心管中，5000rpm离心10min。离心后，取上清0.1ml接种鸡胚37度孵化鸡胚72h（每隔12h照胚，挑出死胚和弱胚），弃掉24h之内的死亡胚收获鸡胚尿囊液之前，将鸡胚置于4度6h以上，促进血管收缩收获尿囊液，测定尿囊液的HA效价，并用新城疫的阳性血清进行HI实验，做出鉴定鸡胚培养法是用来培养某些对鸡胚敏感的病原的一种培养方法，此方法可用以进行多种病原的分离、培养，毒力的滴定，中和试验以及抗原和疫苗的制备等。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内，生长后，鸡胚全身皮肤出现出血点，以脑后最显著。尿囊腔接种22%卵黄囊接种40%绒毛尿囊膜接种38%常见接种方法：羊膜腔接种68%