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微生物实验技术第六章微生物控制技术微生物控制技术实验6-1温度对微生物的影响实验6-2紫外线对微生物的影响实验6-3渗透压对微生物的影响实验6-4氢离子浓度对微生物生长的影响实验6-5化学药剂对微生物的影响了解温度对不同类型微生物生长的影响;学习测定微生物最适生长温度的方法。一、实验目的1温度能影响微生物的生长、繁殖和新陈代谢,每种微生物都有它的生长温度范围,每种微生物只能在一定的温度范围内生长,低温微生物最高生长温度不超过20℃,中温微生物的最高生长温度低于45℃,而高温微生物能在45℃以上的温度条件下正常生长。二、实验原理2实验6-1温度对微生物的影响三、实验材料菌种培养24小时的枯草杆菌和大肠杆菌,培养了72小时的黑曲霉或青霉。培养基牛肉膏蛋白胨琼脂斜面,马铃薯葡萄糖培养基斜面。器材酒精灯,接种针,冰箱,恒温箱。四、实验方法接菌按无菌操作方法进行在5支牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上都接种上枯草杆菌,接种时划直线或曲线。实验6-1温度对微生物的影响实验6-1温度对微生物的影响(2)在另5支牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上都接种上大肠杆菌,接种时划直线或曲线。(3)在5支马铃薯葡萄糖培养基斜面上接种曲霉或青霉,接种时用点接法。2.培养与观察(1)培养将上述接种好的菌种,分别放入0℃、15℃、30℃、37℃、50℃五种温度下培养。(2)观察48小时后观察,记录实验结果。五、实验报告记载实验结果,填入表6-1。实验6-1温度对微生物的影响表6-1不同类型微生物在不同温度条件下培养的生长情况菌种0℃15℃30℃37℃50℃枯草杆菌大肠杆菌黑曲霉/青霉注:用“—”表示不生长,“+”表示生长一般,“++”表示生长良好。紫外线对微生物有强烈的致死作用,波长260nm的紫外线杀菌力最强。其杀菌机制是短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。微生物对紫外线的吸收与剂量有关,剂量高低取决于紫外灯的功率、照射距离与照射时间。在本试验中采用15W紫外灯在距灯30cm处通过改变照射时间来处理微生物。紫外线虽有较强的杀菌力,但其穿透力很弱,普通玻璃、薄纸、水层等均能阻止其透过。二、实验原理一、实验目的了解紫外线的杀菌作用原理;学习紫外线杀菌试验方法。实验6-2紫外线对微生物的影响制平板取无菌平皿6套,将已熔化并冷却至50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿中,使其冷凝成平板。四、实验方法三、实验材料菌种培养24~48h的金黄色葡萄球菌,黏质沙雷氏菌。培养基牛肉膏蛋白胨培养基。器材无菌水,无菌平皿,1mL无菌吸管,玻璃刮铲、灭菌五角星形图案纸(牛皮纸或黑纸),紫外灯箱。实验6-2紫外线对微生物的影响菌悬液制备取试管无菌水2支,以无菌操作法分别取金黄色葡萄球菌和黏质沙雷氏菌各2环,接入无菌水中充分摇匀,制成菌悬液。01接种将已倒入培养基的平皿分为2组,每组3个,一组接金黄色葡萄球菌,一组接沙雷氏菌,用无菌吸管吸取已制好的菌悬液各0.1mL,分别接种于二组平板上,用无菌玻璃刮铲均匀涂布,随即用无菌镊子夹取无菌图案纸一张,小心放在接种好的平皿中央(图6-1)。02实验6-2紫外线对微生物的影响实验6-2紫外线对微生物的影响图案纸2.细菌生长圈3.无菌生长区图6-1检查紫外线对微生物生长的影响试验方法紫外线处理将紫外灯先开灯预热2~3min。再将上述平皿置于紫外灯下,打开皿盖,在30cm距离处照射。一组照1min,1组照5min,l组照l0min,小心地取下图案纸,盖上皿盖。用黑布或厚纸遮盖,送入培养室内。培养将平皿于28~30℃温度下培养48h。4.分组将接种的六个平皿分为三组,每组一个金黄色葡萄球菌,一个黏质沙雷氏菌。01取出平皿观察分析平板上细菌生长的状况,并绘图表示。五、实验报告02实验6-2紫外线对微生物的影响实验6-3渗透压对微生物的影响实验目的了解渗透压对微生物生长的影响。实验原理在等渗溶液中,微生物正常生长繁殖;在高渗溶液中,细胞失水收缩,而水分为微生物生理生化反应所必需,失水会抑制其生长繁殖;在低渗溶液中,细胞吸水膨胀,大多数微生物具有较为坚韧的细胞壁,而且个体较小,因而在低渗溶液中一般不会像无细胞壁的细胞那样容易发生裂解,具有细胞壁的微生物受低渗透压的影响不大。实验6-3渗透压对微生物的影响菌种金黄色葡萄球菌,大肠杆菌
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