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生命科学导论实验一
细胞形态结构观察及显微镜的使用
实验一细胞形态结构观察和光学显微镜的使用
一.实验目的
1.了解和掌握普通光学显微镜的的基本原理和操作规程。
2.了解细胞的基本形态结构。
3.通过比较不同细胞形态,了解正常肝细胞与脂肪肝细
胞的基本形态结构及区别。
二.实验原理
细胞是生物体的基本结构单位。构成生物机体的细胞是多种多
样的。要对细胞进行研究,首先要从其形态结构人手。所以,要借
助显微镜的成像及放大原理,在显微镜下,才能观察到细胞的基本
形态结构。
显微镜概述:
显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光
学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜
以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。
1.光学显微镜
普通生物显微镜由3部分构成:
①照明系统:包括光源和聚光器。
②光学放大系统:由物镜和目镜组成,
是显微镜的主体。
③机械装置:用于固定材料和观察方便,
包括镜台(载物台)、调节器和、
物镜转换器(旋转器)等。
尼康显微镜
E-600基础知识
2.荧光显微镜
荧光显微镜照片(微管
尼康E800荧光DIC显微
呈绿色、微丝红色、核
镜
蓝色)
lLCSM照片
激光共聚焦扫描显微镜
蓝色为细胞核,绿色为微管
4.暗视野显微镜
暗视野显微镜(darkfieldmicroscope)的聚光镜中央有当光片,使照
明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野
的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至4-200nm的微
粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。
5.相差显微镜
一种介壳虫的染色体
6.偏光显微镜
偏光显微镜(polarizingmicroscope)用于检测具有双折射性的物质,如
纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。
7.微分干涉差显微镜
DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比,
其标本可略厚一点,折射率差别更大,故影像的立体感更强。
DIC显微镜下的硅
藻(伪彩色)
8.倒置显微镜
9.透射电子显微镜
JEM-1011透射电子
显微镜
莱卡超薄切片机
冰冻蚀刻电镜照片内质网透射电镜图(伪彩色)
10.扫描电子显微镜
JEOL扫描电子显微镜
人类血细胞SEM照片
尼康NT-88NE显微操
显微操作技术
作/注射仪
l在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率
越高,各物镜的镜口率如下表:
l物镜镜口率(N.A.)工作距离(mm)
l10×0.255.40
l40×0.650.39
l100×1.300.11
l显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积,
l公式为:M=K1xK2
l焦点深度:显微镜调焦到看清标本某一点时,不仅是这一物点,而且它的
l上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全
l厚度,必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。
三、实验程序
(一)显微镜的使用
1.观察前的准备工作
(1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯,观察时要双
眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。
(2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。
(3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整
和正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透
镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。
瞳距调节
显微镜的调节
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