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生命科学导论实验.pptVIP

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生命科学导论实验一

细胞形态结构观察及显微镜的使用

实验一细胞形态结构观察和光学显微镜的使用

一.实验目的

1.了解和掌握普通光学显微镜的的基本原理和操作规程。

2.了解细胞的基本形态结构。

3.通过比较不同细胞形态,了解正常肝细胞与脂肪肝细

胞的基本形态结构及区别。

二.实验原理

细胞是生物体的基本结构单位。构成生物机体的细胞是多种多

样的。要对细胞进行研究,首先要从其形态结构人手。所以,要借

助显微镜的成像及放大原理,在显微镜下,才能观察到细胞的基本

形态结构。

显微镜概述:

显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光

学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜

以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。

1.光学显微镜

普通生物显微镜由3部分构成:

①照明系统:包括光源和聚光器。

②光学放大系统:由物镜和目镜组成,

是显微镜的主体。

③机械装置:用于固定材料和观察方便,

包括镜台(载物台)、调节器和、

物镜转换器(旋转器)等。

尼康显微镜

E-600基础知识

2.荧光显微镜

荧光显微镜照片(微管

尼康E800荧光DIC显微

呈绿色、微丝红色、核

蓝色)

lLCSM照片

激光共聚焦扫描显微镜

蓝色为细胞核,绿色为微管

4.暗视野显微镜

暗视野显微镜(darkfieldmicroscope)的聚光镜中央有当光片,使照

明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野

的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至4-200nm的微

粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。

5.相差显微镜

一种介壳虫的染色体

6.偏光显微镜

偏光显微镜(polarizingmicroscope)用于检测具有双折射性的物质,如

纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。

7.微分干涉差显微镜

DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比,

其标本可略厚一点,折射率差别更大,故影像的立体感更强。

DIC显微镜下的硅

藻(伪彩色)

8.倒置显微镜

9.透射电子显微镜

JEM-1011透射电子

显微镜

莱卡超薄切片机

冰冻蚀刻电镜照片内质网透射电镜图(伪彩色)

10.扫描电子显微镜

JEOL扫描电子显微镜

人类血细胞SEM照片

尼康NT-88NE显微操

显微操作技术

作/注射仪

l在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率

越高,各物镜的镜口率如下表:

l物镜镜口率(N.A.)工作距离(mm)

l10×0.255.40

l40×0.650.39

l100×1.300.11

l显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积,

l公式为:M=K1xK2

l焦点深度:显微镜调焦到看清标本某一点时,不仅是这一物点,而且它的

l上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全

l厚度,必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。

三、实验程序

(一)显微镜的使用

1.观察前的准备工作

(1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯,观察时要双

眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。

(2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。

(3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整

和正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透

镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。

瞳距调节

显微镜的调节

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