2025年微生物课后习题 .pdfVIP

人人好公，则天下太平；人人营私，则天下大乱。——刘鹗

（二）微生物的5个共同特点

（小、多、快、强、广）

1、体积小，面积大

2、吸收多，转化快

3、生长旺，繁殖快

4、适应性强，易变异

5、种类多，分布广

第二章、微生物的纯培养和显微技术

一、何为无菌技术？试列举属于无菌技术范围的具体实验操作环节及注意事项。

无菌技术：在分离、转接及培养纯培养物是，防止其被其他微生物污染，其自身也不污染操

作环境的技术。

二．哪些固体培养基分离技术可以被用来获得目的微生物的纯培养？它们的适用范围及特

点如何？（总结）

1.涂布平板法

先将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板；

将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整

个平板表面；

经培养后挑取单个菌落；

是使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀。

2.稀释倒平板法

稀释：先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000）；

倒平板：然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混匀后，

倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板；

培养：保温培养一定时间即可出现菌落。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可

得到纯培养。

操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好。

3.平板划线法：操作简单，多用于已有纯培养的确定和再次分离。

4.稀释摇管法：稀释倒平板的一种变通形式，但由于菌落形式在琼脂柱的中间观察和挑取

困难

三、在何种情况下，你会选择使用液体分离法或单孢子（细胞）分离法来获得微生物的纯

培养？（自己总结）

用液体培养基分离纯培养

一些细胞大的细菌、许多原生动物和藻类等，需要用液体培养基分离来获得纯培养。

接种物在液体培养基中进行顺序稀释，以得到高度稀释的效果，使一支试管中分配不到一个

微生物。若稀释后同一梯度的平行试管中大多数（95％）没有，那么有微生物的可能是纯

培养，否则可能性下降。

单细胞（孢子）分离：采取显微镜分离法从混杂群体中直接分离单个细胞货或单个个体进行

培养以获得纯培养，叫单细胞分离法，适合较大的微生物，藻类，原生动物较易。

四、为什么说菌种保藏技术对于微生物学的研究和应用都具有重要意义？你认为哪些菌种

太上有立德，其次有立功，其次有立言，虽久不废，此谓不朽。——《左传》

保藏技术可被用于保藏大肠杆菌及枯草芽孢杆菌菌株？（答案自己总结）

微生物的保藏技术缺壁突变L型细菌

菌种保藏目的：给微生物一特定的条件，使其不污染、不改变特性而存活下来。

菌种保藏方法

传代培养保藏——隔绝空气低温保藏

冷冻保藏——保护剂+菌种——零下196℃速冻保存，或-70℃冷冻室保存，-30~-20℃普通冰

箱冷冻室保存。

干燥保藏——沙土管保存法和冷冻真空干燥保藏法

五、使用油镜时为什么要滴加香柏油？

介质折射率提高，数值孔径值和分辨率均得到提高，香柏油与玻璃的折射率相近，很多原来

由于在透镜及载片表面的反射和折射而损失的光线可以进入物镜,使照明亮度提高,改善观察

效果。

六、哪些因素会影响显微镜测定的细菌细胞大小？如果在实验中偶然发现某菌具有特异的

细胞形态，你该如何对待？

1个体差异；2干燥、固定后的菌体会一般由于脱水而比活菌体缩短1/3-1/4；3染色方法的

影响，一般用负染色法观察的菌体较大；4幼龄细菌一