微生物的生长与控制.pptVIP

作业试述肽聚糖的生物合成过程Chapter6

MicrobialGrowthandItsControl

微生物的生长繁殖及其控制01生长的定义及测定方法第一节微生物生长(Growth)：是指细胞物质有规律地、不可逆增加的生物过程。微生物繁殖(Reproduction)：是微生物生长到一定阶段由于细胞内各种细胞结构的复制和重建导致产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的整个生物学过程。微生物生长一般指群体生长一、测生长量直接法：测体积法；称干重法间接法比浊法生理指标法1.比浊法特点：快速、简便；但易受干扰。原理是在一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比，菌数越多，光密度越大。因此，借助于分光光度计，在一定波长下测定菌悬液的光密度，就可反应出菌液的浓度。比浊法01菌液浓度02吸光值（OD值）2.生理指标测定法测含氮量法蛋白质总量=含氮量×6.25细胞总量=蛋白质总量/（50%~80%（或65%））=蛋白总量×1.54测含碳量以及测磷、DNA、RNA、ATP、DAP（二氨基庚二酸）、几丁质等。产酸、产气、耗氧、粘度和产热等。二、计繁殖数直接计数法间接计数法直接计数法：指用计数板在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。血球计数板法适用范围：个体较大细胞或颗粒，如血球、酵母菌等。不适用于细菌等个体较小的细胞，因为（1）细菌细胞太小，不易沉降；（2）在油镜下看不清网格线，超出油镜工作距离。特点：快速，准确，对酵母菌可同时测定出芽率，或在菌悬液中加入少量美蓝可以区分死活细胞。原理：将1cm2×0.1mm的薄层空间划分为400小格，从中选取80或100小格，计数其中的细胞数目，换算成单位体积中的细胞数。2.涂片染色法应用：可同时计数不同微生物的菌数，适

于土壤、牛奶中细菌计数。方法：用镜台测微尺计算出视野面积；取

1ml菌液涂于1cm2面积上，计数后代

入公式：每ml原菌液含菌数=视野中平均菌数×涂布面积/视野面积×100×稀释倍数2、间接计数法（1）平板菌落计数法（2）膜过滤法01.（1）平板菌落计数法平板菌落计数法：浇注平板或涂布平板平板菌落计数法技术要求：样品充分混匀，操作熟练快速（15~20min完成操作），严格无菌操作；注意事项：每一支吸管只能用于一个稀释度，样品混匀处理，倾注平板时的培养基温度；适用范围：中温、好氧和兼性厌氧、能在营养琼脂上生长的微生物，误差：多次稀释造成的误差是主要来源，其次还有由于样品内菌体分布不均匀、以及不当操作Astandardplatecount(viablecount)reflectsthenumberofviablemicrobesandassumesthateachbacteriumgrowsintoasinglecolony;platecountsarereportedasnumberofcolony-formingunits(CFU)perml(CFU/ml)orperg(CFU/g)ofsample.0102（2）薄膜过滤计数法常用该法测定含菌量较少的空气和水中的微生物数目。将定量的样品通过薄膜（硝化纤维素薄膜、醋酸纤维薄膜）过滤，菌体被阻留在滤膜上，取下滤膜进行培养，然后计算菌落数，可求出样品中所含菌数。膜过滤法第二节、微生物的生长规律一、纯培养技术纯培养的定义：纯培养(Pureculture)：微生物学中将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养2、获得纯培养的技术010203平皿划线分离法稀释平皿分离法单细胞挑取法pourplatemethod（稀释倒平板法）10-110-210-310-410-510-610-710-810-9spreadplatemethod（涂布平板法）3）streakplatemethod（平板划线分离法）3.单细胞挑取法接种针解剖镜………....…二、微生物的个体生长和同步生长同步培养：是一种培养方法，它能使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。同步生长：以同步培养方法使群体细胞能处于同一生长阶段，同时进行分裂的生长方式称为同步生长。同步细胞或同步培养物：通过同步培养方法获得的细胞称~。同步培养物常被用来研究在单个细胞上难以研究的生理与遗传特性和作为工业发酵的种子，它一种理想的材料。0102温度培养基成分控制其他2、环境条件