梨脂质转移蛋白nsLTP基因鉴定及其调控果皮蜡质形成的初步研究.pdf

目录

摘要I

ABSTRACTIII

缩略词表VII

引言IX

第一章文献综述1

1植物角质层蜡1

1.1角质层蜡质成分1

1.2角质层蜡的生物合成2

1.3角质层蜡的转运3

1.4角质层蜡功能5

2植物非特异性脂质转移蛋白6

3园艺作物果实表面积测定8

4本研究的目的意义9

第二章梨等园艺作物果实表面积的三维激光扫描测定方法11

1材料与方法12

1.1材料12

1.2方法12

2结果与分析15

2.1标准块和乒乓球表面积的测量15

2.2梨等园艺作物果实的表面积测量17

3讨论20

第三章梨等蔷薇科物种脂质转移蛋白（LTP）家族分析21

1材料与方法22

1.1非特异性脂质转移蛋白（nsLTP）序列收集与鉴定22

1.2系统发育分析23

1.3保守基序、基因结构及顺式元件研究23

1.4共线性分析与重复基因对鉴定23

1.5基因重复事件与Ka、Ks和Ka/Ks分析23

1.6基因表达模式分析24

2结果与分析24

2.1蔷薇科物种nsLTP的鉴定与序列分析24

2.2nsLTP基因序列及系统发育分析25

2.3白梨nsLTP的保守基序、基因结构和启动子分析26

2.4nsLTP基因家族的基因复制事件和共线性分析28

2.5PbrLTP基因家族的进化分析30

2.6PbrLTP基因的表达模式31

3讨论33

第四章PbrLTP基因调控梨果皮蜡质形成功能研究35

1材料方法35

1.1实验材料35

1.2蜡质提取及检测36

1.3实时荧光定量（qRT-PCR）分析36

1.4目的基因克隆与回收37

1.5载体构建38

1.6亚细胞定位39

1.7梨果实瞬时转化40

2结果与分析40

2.1PbrLTP基因在‘玉露香’梨不同发育时期的表达量40

2.2梨果实发育时期总蜡变化43

2.3PbrLTP基因在不同品种梨果实发育时期的表达量44

2.4PbrLTP候选基因的克隆与亚细胞定位45

2.5Pbr041771.1基因的瞬时过表达分析47

3讨论48

全文结论51

创新点53

参考文献55

附录67

致谢85

攻读学位期间发表论文及参与的科研项目87

梨脂质转移蛋白nsLTP基因鉴定及其调控

果皮蜡质形成的初步研究

摘要

梨果实角质层蜡质属于重要果实外观品质之一，表皮蜡质的成分、含量等对果实

抵御生物与非生物胁迫有重要意义。近年来，在研究果实表皮蜡质、色泽、病斑、果

锈时，常常需要准确测量着色、果锈、病斑等区域表面积以及全果表面积的精确数据，

而园艺作物种质资源丰富，果实形状也多种多样，精确测量果实表面积难度较大。因

此，本研究提出并应用FARO三维激光扫描臂进行果实表面积精确测量，并通过测量

标准块，乒乓球等标准品的表面积验证其准确性。此外，本研究基于已公布的全基因

组数据，借助生物信息学手段分析了梨等八种蔷薇科植物脂质转移蛋白（non-specific

LipidTransferP