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细菌基本检验技术.pptVIP

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实验一

细菌检验基本技术(三)1掌握细菌和基本形态和特殊结构。32掌握革兰染色法和熟悉细菌涂片的制备。掌握观察菌落的方法,了解细菌在液体、半固体培养基的生长表现及意义。目的【器材】显微镜、载玻片、察镜纸、小镊子、接种环、酒精灯等细菌染色标本的制作程序涂片干燥固定染色芽胞染色法(sporestain)革兰染色法(Gramstain)染色方法革兰染色法(Gramstain)”初染:结晶紫+等量NaHCO33~5s,水洗1脱色:丙酮酒精3~5s,水洗3媒染:碱性碘液3~5s,水洗2复染:碱性稀释复红3~5s,水洗4方法(改良快速法)结果紫色:革兰阳性菌红色:革兰阴性菌芽胞染色法(sporestain)方法:涂片→干燥→固定→5%孔雀绿加温染3~5min→水洗→0.5%沙黄1min→水洗、晾干、油镜检结果:菌体呈红色,芽胞呈绿色。12染色关键:脱色时间的长短其他影响因素:菌龄、涂片厚薄、染液革兰阳性菌——金黄色葡萄球菌ATCC25923革兰阴性菌——大肠埃希菌ATCC25922影响因素质量控制三、拉丝试验原理:革兰阴性菌的细胞壁在稀碱溶液中容易破裂,释放出未断裂的DNA螺旋,使菌液呈粘性。方法:结果:有丝出现(拉丝试验+)——革兰阴性菌无丝出现(拉丝试验-)——革兰阳性菌用途:用于快速鉴别革兰阳性菌和革兰阴性菌

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