3.1 重组DNA技术的基本工具（分层作业）（原卷版）.docx

第1节重组DNA技术的基本工具

1．血浆中含有大量蛋白质和少量脂质等，血浆cfDNA与蛋白质紧密粘附结合，提取血浆cfDNA的步骤主要有：配制洗涤液→样本裂解→DNA析出→DNA吸附→杂质洗涤→DNA洗脱与收集。下列说法错误的是（????）

A．样本裂解的目的是裂解血细胞，使其含有的DNA释放

B．可以通过加入体积分数95%的预冷乙醇，轻轻颠倒混匀的方式析出DNA

C．洗涤液的作用是高效去除血浆中的蛋白质和脂质等

D．洗脱DNA的洗脱液中含有一定浓度的NaCI

2．致育因子又称F因子，是游离在大肠杆菌细胞质中的一种环状DNA，能指导性菌毛的合成，性菌毛形成连接相邻大肠杆菌间的通道。含致育因子的大肠杆菌（F+）借助通道将自身的遗传物质传递给不含致育因子的大肠杆菌（F－），继而完成细胞的暂时沟通和遗传物质转移，（F－）转化为（F+），过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A．F－转化为F+的过程中发生了基因重组

B．F+中的F因子仅有一条DNA链进入F－

C．完成转化过程的F－获取了F+中的大多数性状

D．F－转化为F+的转化过程需要内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶和解旋酶参与

3．如图是碱裂解法提取大肠杆菌质粒DNA的简要步骤。下列说法错误的是（????）

AI

A．碱性试剂2可破坏大肠杆菌的细胞膜，从而释放细胞内容物

B．试剂3利用了拟核DNA与质粒DNA的长度差异，仅使前者沉淀

C．①步骤结束后应敞开管盖，待残余酒精完全挥发后再进行②步骤

D．可用任意浓度的NaCl溶液替换②步骤所用的水，以溶解质粒DNA

4．DNA琼脂糖凝胶电泳是指利用在溶液中带负电荷的DNA分子在电场中向正极移动的原理，分离、纯化或分析PCR扩增后的待检DNA片段的生物化学技术。下列说法错误的是（????）

A．DNA片段相对分子质量越大，迁移就越慢

B．凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合，用于分离后DNA片段的检测

C．拟回收的DNA区带融化后可先用DNA抽取剂抽提，再用70％的冷乙醇沉淀抽提DNA片段，从而提高回收率

D．新冠病毒核酸检测出现假阳性的原因可能是阳性对照中模板核酸与样品交叉污染

5．限制性内切酶介导的整合技术（REMI）是一种研究基因的新方法。用限制酶切得到的线性质粒与该酶组成的转化混合物进入并转化细胞时，会切割受体细胞基因组，产生与线性质粒互补的黏性末端，线性质粒通过碱基配对插入基因组。如果插入发生在一个已知基因的内部，则该基因的功能可能改变或丧失，即发生了基因突变。下列相关叙述，不正确的是（????）

A．当外源质粒带有抗性基因时，可根据其在受体细胞内的表达情况筛选转化细胞

B．REMI技术使基因突变具有随机性，且限制酶识别序列越长，随机性越大

C．所有的限制酶都具有专一性

D．限制酶、DNA连接酶、载体是REMI技术的三种分子工具

6．用限制酶BamHⅠ、HindⅢ单独或联合切割某DNA分子（长度为14kb），在完全酶切（每个切点都被切断）时得到的DNA片段长度如图所示（1kb即1000个碱基对）。下列说法错误的是（????）

A．该DNA分子上没有BamHⅠ的酶切位点

B．该DNA分子上有2个HindⅢ的酶切位点

C．该DNA分子为环状DNA分子

D．用BamHⅠ和HindⅢ联合切割该DNA分子，最多可能得到7种不同长度的线性片段

7．下图为不同限制性核酸内切膀识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是（????）

A．图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列

B．若DNA上的碱基随机排列，NotI限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高

C．酶切时使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化

D．用酶BglII切出的目的基因与酶BamHI切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开

8．RNA干扰(RNAi)指的是将双链RNA(dsRNA)导入细胞后，在Dicer的作用下形成较小的RNA片段，这些片段在进一步解链后与酶形成沉默复合体RISC，从而引起相应mRNA发生降解，进而导致其相应的基因沉默的现象，其作用机理如图所示。下列叙述错误的是（????）

A．dsRNA分子中大部分磷酸基团都能与两个核糖相连接

B．Dicer作用的化学键与限制酶作用的相同

C．RNAi能特异性关闭相应基因的表达

D．RNAi的实质是基因表达过程中的转录被阻断

9．下图表示不同的限制酶在目的基因的提取和基因表达载体的构建中的作用，下列有关叙述错误的是（）

A．限制酶沿识别序列的中轴线两侧将DNA两条链切开

B．在图1和图2中将分别产生4个和2个粘性末端

C．限制酶切割的是特定核苷酸序列之间的磷酸二酯键和氢键

D．图示中酶1、酶2和酶3