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通窍活血汤对谷氨酸损伤PC12细胞保护作用的实验研究--第1页
中国中医药科技２００８年３月第ｌ５卷第２期Ｍａｒ．２００８．Ｖｏ１．１５Ｎｏ．２・１０１・
通窍活血汤对谷氨酸损伤ＰＣｌ２
细胞
保护作用的实验研究＊
汪宁许风清邓奕陈威刘金旗朱荃
（安徽中医学院・安徽省中药研究与开发重点实验室・合肥２３００３１
南京中医药大学・江苏省方荆研究重点实验室・南京２１００２９）
摘要目的：观察通窍活血汤对谷氨酸致Ｐｃ。：细胞损伤的保护作用。方法：采用谷氨酸诱导的Ｐｃ细
胞损伤，作为脑缺血缺氧的体外研究模型，采用ＭＴｒ比色法和乳酸脱氢酶（ｔｏｎ）活力检测法，观察通窍活
血汤水提醇沉液对谷氨酸致Ｐｃ。２细胞损伤的保护作用。结果：通窍活血汤水提醇沉液能明显改善谷氨酸
诱损伤的ＰｃＩ２细胞的活力。并能使损伤细胞的细胞上清液中的ＬＤＨ含量明显减少。结论：通窍活血汤
可减轻兴奋性氨基酸所致的神经元损伤，对神经元具有保护作用。
主题词通窍活血汤Ｐｃ，２细胞谷氨酸损伤保护作用
通窍活血汤系清代名医王清任创立的活血化瘀方剂，该生药／ｍｌ。将上述水提取液３２０ｍｌ进行醇沉，加入ｌ２００ｒｎＪ９５％
方具有活血通窍之功效，主要由赤芍、ＪＩＩ芎、桃仁、麝香、红花的乙醇，边加边搅拌，至乙醇浓度为７５％，放置４￣Ｃ冰箱过夜
等药味组成，临床用于脑血管疾病治疗有良好效果［】“］。关后取出来，抽滤，去沉淀取上清液，加热蒸馏回收乙醇后溶液
于其在细胞水平抗脑缺血损伤作用及其机制的研究报道甚转入坩埚内浓缩至体积小于２００ｍｌ，麝香先用酒精溶解、静置
少，本文采用谷氨酸诱导的Ｐｃ。细胞损伤模拟急性缺血性脑后（浓度小于５％），加入到加热的浓缩液中，加热搅拌几分
血管疾病的基本病理过程，观察通窍活血汤对谷氨酸致Ｐｃ。钟后，加蒸馏水定容至２００ｍｌ，终浓度为１．６ｇ生药／ｍｌ，冷藏
细胞损伤的保护作用。备用。
１实验材料２．２通窍活血汤水提醇沉液细胞用液的制备取１．６ｇ生
１．１药品与试剂川芎、赤芍、桃仁、红花、人工麝香等药材药／ｍｌ的通窍活血汤水提醇沉液，用ＤＭＥＭ溶液稀释至０．８ｇ
购自合肥和义堂中药饮片有限公司。人工麝香由北京联馨生药／ｍｌ，在超净台内，用０２２ｐｍ滤膜过滤除菌，滤液备用。
药业有限出品。尼莫同（尼莫地平注射液）：德国拜耳医药保２．３细胞的培养、分组及指标测定将对数生长期的Ｐｃ。
健股份公司。谷氨酸（Ｇｌｕ）：Ｓｉｇｍａ公司产品。Ｔｒｙｐｓｉｎ、高糖细胞以ｌ／孑Ｌ密度接种于９６孔板，３７℃、５％ｃ０２孵箱中培养
ＤＭＥＭ：Ｇｉｂｃｏ公司产品。ＤＭＳＯ、乙醇均为市售分析纯。ＭＴｒ：２４小时后，更换培养液，实验分为正常对照组（不加谷氨酸
ＡⅡｌｅ砌公司产品。胎牛血清：购自杭州四季青生物工程材损伤的正常细胞组）、模型组（谷氨酸损伤的细胞组，浓度为
料有限公司。乳酸脱氢
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