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高性能淀粉酶菌株的筛选及培养基优化[开题报告]--第1页
毕业论文开题报告
生物工程
高性能淀粉酶菌株的筛选及培养基优化
1选题的背景和意义
淀粉酶在工业酶制剂生产中占有十分重要的地位，广泛应用于粮食加工、食品工业、酿
造、发酵、纺织品工业和医药行业，居市场份额第一。但是，我国的α-淀粉酶制剂的品种
[1]
和生产菌株都很单一，α-淀粉酶活也较国外同行业低。淀粉酶的生产主要依靠微生物发
酵。而近年来，尽管转导转化和基因克隆等分子生物技术已经广泛应用，但是这些方法成本
较高，目前投入商业化生产的α-淀粉酶生产菌株几乎都是通过从自然界中分离得到的野生
[1]
型菌株。因此不断然界中分离淀粉酶产生菌，并探索其最佳发酵条件有重要意义。
本次实验然界中分离产淀粉酶的菌株，通过测定酶活筛选出产酶量较高的菌株，利
用液体发酵法对其产α-淀粉酶培养基配方进行优化，获得在生产应用方面具有一定优势的
α-淀粉酶产生菌以及其较优的培养基配方，以适应工业生产需求。
2相关研究的最新成果及动态
在菌种筛选方面，一般是采用碘比色法或者DNS比色法，测定淀粉酶酶活[3-5]。即通过
测定淀粉酶水解的淀粉的量，或者生成的麦芽糖的量来测定其相应酶活。上面有种方法虽然
原理上有所不同，但实际操作上较为相似。而且由于其试剂配制方便，操作简单，灵敏度高，
[6]
故在国内广泛应用。而在临床医学领域应用较为广泛的试剂盒法，由于其价格昂贵，一般
不做为生物实验室的检查手段。
在培养基配制优化上，由于数学统计以及计算机技术的发展，统计学中的多种优化方法
已开始广泛地应用于微生物发酵培养基的优化工作中，其中以响应面方法的效果最为显著
[7]。响应面方法(ResponseSurfaceMethodology,简称RSM)是利用合理的试验设计并通过实
验得到的一定数据，采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之间的函数关系，通过对回
归方程的分析来寻求最优工艺参数，解决多变量问题的一种统计方法。由于该方法试验次数
少、周期短，求得的回归方程精度高、能研究几种因素间交互作用，故近年来广泛应用于各
种培养基的优化上。RSM在优化研究中应用频繁，是降低开发成本、优化加工条件、提高产
品质量、解决生产过程中的实际问题的一种效方法。[8]
1
高性能淀粉酶菌株的筛选及培养基优化[开题报告]--第1页
高性能淀粉酶菌株的筛选及培养基优化[开题报告]--第2页
3课题的研究内容及拟采取的研究方法、研究难点及预期达到的目标
3.1课题研究内容
高性能淀粉酶菌株的筛选及其培养基优化。
3.2研究方法
初筛：以淀粉为唯一碳源，比较碘液水解圈直径与菌落直径比值（D/d）
复筛：将初筛得到的菌株摇瓶发酵，通过DNS法或者碘比色法测定酶活，比较其单位体
积发酵效率。
培养基成分优化：通过单次因子法，考察培养基组分中各因子对淀粉酶生产的影响和规
律。利用Plackett-Burman实验设计方法、响应面分析对培养基中主影响因子进行优化，
并建立起培养基主因子和淀粉酶生产能力的相应数学模型。
查阅相关文献
采样（土壤）
含淀粉有机物
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