氮杂黄酮类PROTAC偶联药物抗肝癌药理学研究.pdf

摘要

肝癌是发生于肝脏或从肝脏开始的恶性肿瘤。肝癌细胞所引起的肝癌占到90%，

随着治疗手段不断革新，靶向分子治疗逐渐成为关键的肝癌治疗药物。多种氮杂黄

酮类成分药物从植物中被广泛提取，并有一定的抗肝癌作用。氮杂黄酮类化合物结

构的优化可能收获更加有效的肝癌治疗药物。蛋白靶向降解技术（PROTAC）是泛

素蛋白酶体和溶酶体降解目标蛋白的一种技术，使单体药物结构通过连接子与E3连

接酶配体相连，进而获得一系列活性更好的PROTAC偶联药物。基于本实验室前期

自主设计合成的氮杂黄酮类衍生物2-38，本研究设计和合成了一系列PROTAC偶联药

物并筛选出了对多种肿瘤细胞均具有较好增殖抑制活性的化合物2-38-Ⅲ，发现其对

肝癌细胞抑制作用显著，并进一步评价其在HepG2细胞中的抗肿瘤活性及作用机制。

本研究分别从体外细胞水平和体内动物水平评价了2-38-Ⅲ的抗肿瘤活性及作用

机制。体外细胞水平的研究中发现，化合物2-38-Ⅲ能够有效抑制HepG2细胞的增殖

和细胞集落的形成，细胞的迁移和HUVEC细胞的血管形成。2-38-Ⅲ通过影响线粒体

凋亡、MAPK通路以及引起细胞周期S期阻滞等途径促进对HepG2细胞的凋亡，凋亡

率达45.4%,线粒体膜电位降低，活性氧升高以及周期阻滞。在体内动物水平的研究中

发现，2-38-Ⅲ在异位移植瘤Balb/C裸鼠模型中能有效地阻碍瘤块的增长，抑制率达

58.48%，并促进肿瘤细胞的凋亡；化合物2-38-Ⅲ具有明显的抑制肿瘤细胞增殖、转

移和血管新生的作用，并与细胞水平结果一致。对小鼠肝肾毒性测试结果显示，化

合物2-38-Ⅲ在治疗过程中没有影响肝脏和肾功能，没有显著的肝肾毒性。

本课题首次阐明氮杂黄酮类化合物与PROTAC技术结合所得—PROTAC偶联药物

2-38-Ⅲ作为治疗肝癌药物的活性与作用机制，探索了其在蛋白降解靶点的范围方向，

为后期找寻准确作用靶点奠定基础。开拓了氮杂黄酮类药物结构的优化方式以及改

善其在肿瘤治疗上的局限性。这一新兴偶联药物有望为肝癌药物靶点单一及易产生

耐药性等问题提供新的解决思路。

关键词：肝癌；氮杂黄酮类化合物；PROTAC偶联药物；细胞毒性评价；作用机制

ABSTRACT

Hepatocarcinomaisamalignancythatoccursinorstartsinthehepatic.Hepatocellular

carcinomaaccountfor90%ofhepatocarcinomaandwiththecontinuousinnovationof

treatmentmethods,targetedmoleculartherapyhasgraduallybecomeakeyhepatocarcinoma

treatmentdrug.Avarietyofazaflavonoidsarewidelyextractedfromplantsandhavecertain

anti-hepatocarcinomaeffects.Optimizationofthestructureofazaflavonoidsmayleadto

moreeffectivehepatocarcinomatreatmentdrugs.ProteinTargetedDegradation(PROTAC)

isatechnologyforubiquitinproteasomeandlysosomaldegradationoftargetproteins,sothat

themonomericdrugstructureislinkedtotheE3ligandthroughthelinker,therebyobtaining

aseriesofmoreactivePROTACconjugates.Basedontheazoflavonederivatives2-38

independentlydesignedandsynthesizedinthelaboratory,aseriesofPROTACconjugate

drug