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红肉火龙果糖转运蛋白基因HpSWEET7的表达和转运活性鉴定

目录

红肉火龙果糖转运蛋白基因HpSWEET7的表达和转运活性鉴定（1）．．3

内容概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.3国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.2基因克隆与表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.2.1HpSWEET7基因的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.2.2HpSWEET7基因的表达载体构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.2.3HpSWEET7基因的表达验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.3转运活性鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.3.1转运活性测定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

2.3.2HpSWEET7转运蛋白的活性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.1HpSWEET7基因的表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

3.1.1HpSWEET7基因的表达水平．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

3.1.2不同组织中的表达差异．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

3.2HpSWEET7基因的转运活性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

3.2.1转运底物的识别与结合．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

3.2.2转运效率的测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

3.2.3转运途径的验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

红肉火龙果糖转运蛋白基因HpSWEET7的表达和转运活性鉴定（2）．24

一、内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

1.1红肉火龙果的研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

1.2糖转运蛋白基因的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

1.3研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

二、实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

2.1.1植物材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.1.2试剂与工具．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

2.2.1基因克隆与序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.2.2载体构建与转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.2.3转基因植株的鉴定与表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.2.4糖转运活性的鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

三、结果与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

3.1HpSWEET