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HIV实验室诊断;一、HIV的一些相关知识:
1.HIV的结构
2.HIV基因组成及结构
3.HIV感染的免疫反应
二、HIV的实验室检查
1.实验室、人员及设备要求
2.实验室检测
3.职业暴露
;;2、HIV的基因分型
HIV可分为两个型:HIV-Ⅰ和HIV-Ⅱ。
(1)基因组成:
Ⅰ:LTR-gag-pol-vif-vpr-tat-rev-vpu-env-
nef-LTR.
Ⅱ:LTR-gag-pol-vif-vpx-vpr-tat-rev-env-
nef-LTR.
结构基因:gag、pol、env
调节基因:tat、rev、nef、vif、vpu
附属基因:vpr、vpx;;(3)两者的主要区别:
①Ⅰ型含有vpu,而Ⅱ型含vpx。
②vpr和nef与其他基因的关系也不同:
AHIV-Ⅰ的vpr与vif相互重叠,而nef
与env不重叠;
BHIV-Ⅱ的vpr与vif不重叠,而nef与
env相互重叠。;
(4)基因表达产物:
HIV-ⅠHIV-Ⅱ
env:gp160gp120gp41gp140gp105gp36
gag:p55p24p18p56p26p16
pol:p65p51p31p68p53p34
;3.HIV感染的免疫反应
;实验室要求:
实验室分级:初筛实验室
确证实验室
粤卫[2004]305号文规定:05年6月份前在
县级以上收治定点医院建立初筛实验室。
填写申请、评审、批准
要求:
HIV血清学试验:BSL-Ⅱ(P2)
HIV病毒研究:BSL-ⅢP3);初筛实验室设计和建造的要求:
⑴有专用实验室(至少专用检测台),应划分清洁区和污染区,并有明显标记,有充足的操作空间。
(2)实验室墙面、地面、台面材料应来耐酸、碱、易清洁消毒、不渗漏液体;室内应有防蚊、防蝇、防鼠等设备;⑶检验台上应装置紫外灯。
⑷备有消毒药品、消毒器材和消毒设备。
⑸有感应流水装置,备有冲眼睛水,足够的
一次性手套、口罩、隔离服和防护眼镜。
(6)实验室应装置恒温设备,室温为20~25℃。;BSLⅡ实验室:
设计和建造的要求(增加):
⑴应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。
⑵应设置实施各种消毒方法的设施,如高压灭
菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。
⑶应设置洗眼装置。
⑷实验室门宜带锁、可自动关闭。
⑸实验室出口应有发光指示标志。;BSLⅡ实验室:
安全设备:
Ⅱ生物安全柜或其他物理抑制设备;HIV抗体初筛检测程序:
;HIV抗体的检测:
1.初筛试验方法及原理:
(1)ELISA
(2)明胶凝集试验
(3)金标法
(4)自动化仪器测定;2.确证试验:免疫印迹法、间接免疫荧光法、免疫沉淀法
(1)方法原理
(2)确证试验结果判断:
美国CDC:gp160/gp120或p24/gp41任意二条带
美国FDA:gp160/gp120或p24、gp41、p31三者
组合
WHO:至少二条以上env带
美国红十字:gag、pol、env每组至少一条带
中国:至少二条以上env带或一条env带和一条
(gag)p24带。;3注意事项
(1)相关的政策和规定
(2)临床操作中的注意事项
(3)初筛与确证结果的差异及解释
(4)医疗纠纷;医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则(试行)(2004.5.31):
第八条
医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后,应当立即实施以下局部处理措施:;1用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤,用生理盐水冲洗粘膜。
2如有伤口,应当在伤口旁轻轻挤压,尽可能挤出损伤处的血液,再用肥皂液和流动水进行
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