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四、(2025松江一模)染料废水的生物处理(26分)
活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料。欲利用生物酶处理染料废水中的活
性黑5,具体操作流程如图6。从染料废水堆积池的污泥中获得优势菌群,采用浓度梯
度驯化法,进一步培养获得具备强分解活性黑5能力的假单胞杆菌,并进行基因表达
分析。
图6
24.(2分)培养基I中,除了活性黑5以外,还需添加的成分是。(多选)
A.葡萄糖B.抗生素C.水D.琼脂
25.(2分)培养基I从用途上属于。(编号选填)
①固体培养基②液体培养基③通用培养基
④选择培养基⑤鉴别培养基
26.(2分)将细菌从培养基I转移到培养基II的目的是。
27.(2分)浓度梯度驯化过程中,培养液中可能出现的变化有。(多选)
A.假单胞杆菌中BVU5蛋白的含量B.假单胞杆菌对活性黑5的分解速率
C.假单胞杆菌的菌落数目D.假单胞杆菌中BVU5蛋白的空间结构
28.(2分)假单胞杆菌中,BVU5蛋白分解活性黑5的场所最可能为_______。(单选)
A.拟核B.细胞质基质C.溶酶体D.核糖体
29.(2分)据图6和所学知识推测,驯化后的假单胞杆菌增强了BVU5基因的_____。(多
选)
A.复制B.转录C.翻译D.逆转录
科研人员为了实现在大肠杆菌中大量表达外源BVU5蛋白,首先需要利用PCR技
术获得BVU5编码基因。该基因编码链首尾处各20个核苷酸的序列及相关信息如图7。
图7
30.(2分)已知BVU5基因编码链总长为1098个核苷酸,据图7及所学知识分析该基因编
码的BVU5蛋白的氨基酸数目为_______。(编号选填)
①365②366③1095④1098⑤3285⑥3294
31.(4分)若要在基因的前后位置,分别添NcoI及SalI限制性内切核酸酶识别序列,并
大量扩增出BVU5基因,则PCR实验中所需的引物序列为______________________________。
(按5’→3’方向填空,引物长度应为26个核苷酸)
32.(3分)在利用基因工程表达BVU5蛋白的过程中,PCR实验后应进行的步骤依次是
_______。(选择编号并排序)
①筛选和鉴定含BVU5基因的大肠杆菌②从细菌中提取DNA
③DNA连接酶拼接DNA片段④限制性内切核酸酶切割
⑤PCR产物的凝胶电泳鉴定⑥BVU5基因导入受体细胞
33.(2分)若想进一步改良BVU5蛋白,但其结构未知,欲通过蛋白质工程迅速获得BVU5
蛋白突变株,应选用的策略是_______。(单选)
A.定点突变直接改变氨基酸序列B.定点突变直接改变基因序列
C.随机突变直接改变氨基酸序列D.随机突变直接改变基因序列
34.(3分)设计体外实验,验证BVU5蛋白催化反应需要还原型辅酶、而非氧化型辅酶的
辅助。请选择正确的编号补充表3信息。(编号选填)
表3
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