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2025杜氏肌营养不良症新生儿筛查技术研究进展

杜氏肌营养不良症(Duchennemusculardystrophy,DMD)是一种

严重的X连锁隐性经肌肉遗传病，群体发病率约1/(3500-5000)

活产男婴［1］。DMD患儿出生时多无症状，1岁以后常表现为走路晚、

走路慢、易摔倒，随着病变的进展，行走时呈特殊鸭步，自仰卧位起立时

呈高尔征，腓肠肌逐渐假性肥大，一般在12岁以前丧失站立和行走的能

力，多因心力衰竭或呼吸衰竭而死亡［2-3］oDMD虽无治愈的手段，但

随着糖皮质激素应用经验的累积，多学科综合治疗水平的提高，以及心脏

和呼吸系统并发症的及早干预，DMD的病程已发生了显著改变，患者生

存期不断延长。在基因治疗领域，“外显子跳跃”疗法、终止密码子通读

疗法、基因替代疗法和基因组编辑疗法等发展迅速［-6］。这些治疗手段

和药物一旦研发成功，均可进一步缓解患儿病情，提高生活质量，延长寿

命。然而DMD起病隐匿，临床诊断通常延迟，因此DMD的早发现和早

干预在临床上具有重要意义。新生儿DMD筛查是早发现DMD的主要手

段。本文就近年来新生儿DMD筛查的相关指标和技术研究进展综述如下。

一、肌酸激酶(creatinekinase,CK)筛查DMD

1.血清CK：CK是一种与细胞内能量转运、肌肉收缩及ATP再生等有直

接关系的重要激酶，主要存在于骨骼肌、心肌、平滑肌和脑细胞胞质中，

其中骨骼肌含量最为丰富。20世纪50年代发现CK是人体肌肉中含量最

高的特异性酶。临床上将CK作为判定患肌肉疾病的一个重要指标。

DMD患者缺乏抗肌萎缩蛋白(dystrophin),导致骨骼肌细胞膜不稳定，

使肌肉收缩时肌细胞内Ca2+增加，胞内蛋白降解增速，骨骼肌纤维大量

破坏并释放CK入血，表现为血清CK明显升高［7］。DMD患儿生后血

清CK即处于较高水平，通常为正常值的1。倍以上，甚至可高达100倍

［3,7］o冯善伟等［8］通过对36例DMD患者的血清CK变化规律

进行研究发现，DMD患儿的CK水平在5岁前逐渐升高，6~7岁达到峰

值，其后逐渐下降。这是由于在病程早期肌肉中蛋白质降解较快，血清

CK显著升高；病程晚期肌肉明显萎缩，进行性破坏过程停止，CK释放速

度减缓，血清CK升高程度逐渐减少，甚至趋于正常。既往研究结果显示，

50%~70%的DMD携带者也会出现血清CK升高的情况［9-10］。因此，

临床上将CK作为新生儿DMD筛查的指标。但如果使用血清作为筛查样

本，常需从新生儿颈静脉或股静脉采集血液，该方法具有操作不便、创伤

大等缺点，不适用于大规模筛查。

2.干血斑CK：1961年，美国Guthrie医生建立了干血斑采样及检测技

术，用于筛查新生儿苯丙酮尿症。这为开展大规模新生儿筛查奠定了基础。

在此基础上，美国学者Zellweger和Antonik［11］于1975年首次采用

以萤火虫荧光素酶为主要试剂的生物发光法成功检测干血斑中的CK,并

筛查了1500例男性新生儿，使得大规模开展DMD新生儿筛查成为现实。

该研究初步证明了DMD新生儿筛查的可行性，具有里程碑意义。但该方

法具有试剂成本高、花费时间长(20h)和需要使用特定仪器的缺点，应

用受到了一定的限制。随后，不断有学者对检测方法进行改进。198年，

Orfanos等［12］开发了对微量分析较灵敏的荧光法。该法操作简单，价

格低廉，进一步促进了新生儿DMD筛查的发展。

德国采用“三步法”率先进行了试点新生儿DMD筛查，即首先检测干血

斑CK,对于筛查结果异常的样本，召回新生儿并采集血清样本进行复查；

如果血清CK仍然升高，则进一步通过检测患儿DMD基因或肌肉活检确

诊。筛查结果显示，176600例男性新生儿受试者中，8例确诊为DMD

［13］。新生儿DMD筛查帮助临床医生更早地发现和诊断该病，有利于

早期干预，同时也证明了干血斑CK作为筛查指标的有效性。自2。世纪

80年代以来，法国、新西兰、加拿大、英国威尔士和美国部分州相继开

展了新生儿DMD筛查。Gatheridge等［1］进行的回顾性分析显示，

1975年至2011年，全球10个较大筛查量的新生儿DMD筛查项目共

筛查了180多万例新生儿，确诊了3例DMD患儿，效果显著。

但值得关注的是，CK是骨骼肌损伤的非特异性标记物，与一系列肌肉疾

病相关，且水平也受新生儿产