机体免疫功能的检测技术.ppt

B细胞EA、EAC花环试验第39页,共63页，星期六，2024年，5月第40页,共63页，星期六，2024年，5月第41页,共63页，星期六，2024年，5月第二节体液免疫功能的检测一、免疫球蛋白的定量检测二、外周血B细胞数目的检测三、外周血B细胞功能的检测第42页,共63页，星期六，2024年，5月三、外周血B细胞功能的检测1.B细胞增殖试验2.溶血空斑试验3.ELISPOT第43页,共63页，星期六，2024年，5月1.B细胞增殖试验非特异性刺激物（美洲商陆）特异性刺激物（抗原）3H-TdR掺入法MTT法形态学计数法第44页,共63页，星期六，2024年，5月溶血空斑试验第45页,共63页，星期六，2024年，5月第46页,共63页，星期六，2024年，5月第一节 免疫细胞的分离与纯化第二节 体液免疫功能的检测第三节 细胞免疫功能的检测第四节 细胞因子及其受体的检测技术第八章机体免疫功能的检测技术第47页,共63页，星期六，2024年，5月第三节细胞免疫功能的检测一、T细胞亚群和数目的检测二、T细胞功能的检测三、其他免疫细胞功能的检测第48页,共63页，星期六，2024年，5月一、T细胞亚群和数目的检测1.免疫荧光技术2.花环试验3.流式细胞术第49页,共63页，星期六，2024年，5月第三节细胞免疫功能的检测一、T细胞亚群和数目的检测二、T细胞功能的检测三、其他免疫细胞功能的检测第50页,共63页，星期六，2024年，5月二、T细胞功能的检测1.体外功能实验2.体内功能实验第51页,共63页，星期六，2024年，5月1.体外功能实验（1）T细胞增殖试验（2）细胞毒试验（3）ELISPOT第52页,共63页，星期六，2024年，5月（1）T细胞增殖试验非特异性刺激物（PHA、ConA、PWM）特异性刺激物（抗原）3H-TdR掺入法MTT法形态学计数法第53页,共63页，星期六，2024年，5月（2）细胞毒试验第54页,共63页，星期六，2024年，5月（2）细胞毒试验第55页,共63页，星期六，2024年，5月第56页,共63页，星期六，2024年，5月2.体内功能实验第57页,共63页，星期六，2024年，5月第三节细胞免疫功能的检测一、T细胞亚群和数目的检测二、T细胞功能的检测三、其他免疫细胞功能的检测第58页,共63页，星期六，2024年，5月三、其他免疫细胞功能的检测1.巨噬细胞功能的检测2.NK细胞和LAK细胞功能的检测第59页,共63页，星期六，2024年，5月1.巨噬细胞功能的检测第60页,共63页，星期六，2024年，5月2.NK细胞和LAK细胞功能的检测NK细胞靶细胞（K562）LAK细胞靶细胞（LiBr)第61页,共63页，星期六，2024年，5月第一节 免疫细胞的分离与纯化第二节 体液免疫功能的检测第三节 细胞免疫功能的检测第四节 细胞因子及其受体的检测技术第八章机体免疫功能的检测技术第62页,共63页，星期六，2024年，5月第四节细胞因子及其受体的检测技术一、细胞因子的检测方法二、细胞因子受体的检测方法第63页,共63页，星期六，2024年，5月（1）Ficoll密度梯度离心法即聚蔗糖－泛影葡胺密度梯度离心法（ficoll-hypaquedensitygradientcentrifugation)Ficoll分层液的密度为：1.077±0.001用于从外周血中分离单个核细胞第7页,共63页，星期六，2024年，5月用Ficoll分离外周血单个核细胞95%2000rpm20min血浆单个核细胞淋巴细胞分离液红细胞粒细胞第8页,共63页，星期六，2024年，5月第9页,共63页，星期六，2024年，5月（2）Percoll密度梯度离心法Percoll即聚乙烯吡咯烷酮包被的硅胶混悬液的商品名，为一种无细胞毒无刺激的新型连续密度梯度分层液。Percoll原液密度1.135用于从单个核细胞中分离单核细胞、淋巴细胞第10页,共63页，星期六，2024年，5月用Percoll分离单核细胞和淋巴细胞75%98%第11页,共63页，星期六，2024年，5月第一节免疫细胞的