机能学实验离体蛙心灌流.ppt

四、实验步骤一、离体蟾蜍心脏标本制备1.破坏脑和脊髓2.仰卧位固定蟾蜍，暴露心脏第6页,共23页，星期六，2024年，5月第7页,共23页，星期六，2024年，5月（腹面）（背面）3.蛙心插管第8页,共23页，星期六，2024年，5月第9页,共23页，星期六，2024年，5月AB蛙心插管在心室收缩时插入心室第10页,共23页，星期六，2024年，5月4.连接仪器记录蛙心搏动曲线第11页,共23页，星期六，2024年，5月五、观察项目（一）描记正常心搏曲线曲线幅度——收缩的程度曲线疏密——心率曲线基线——舒张的程度第12页,共23页，星期六，2024年，5月1.换成无钙任氏液灌注，冲洗（下同）

2.加入3%氯化钙溶液1～2滴

3.加入1%氯化钾溶液1～2滴

4.加入1:10000肾上腺素溶液1～2滴

5.加入1:10000乙酰胆碱溶液1～2滴

6.加入2.5%碳酸氢钠溶液1～2滴

7.加入3%乳酸溶液1～2滴（二）观察离子、药物和酸碱的影响第13页,共23页，星期六，2024年，5月五、注意事项1.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必须用任氏液冲洗3次。2.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液体吸出。3.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。4.换能器头端应向下倾斜以免液体进入换能器。第14页,共23页，星期六，2024年，5月六、实验结果观察项目心率收缩程度1．无钙任氏液2．2%CaCl23．1%KCl4．Adr5．Ach6．2.5%NaHCO37．3%乳酸第15页,共23页，星期六，2024年，5月观察项目心率收缩幅度（收缩力）无钙任氏液3%CaCl21%KClAdrAch2.5%NaHCO33%乳酸↓↓↑↑（“钙僵”）(甚至停于舒张期)↓↓↓↓↓↓↑↑↑↑第16页,共23页，星期六，2024年，5月七、结果分析与讨论第17页,共23页，星期六，2024年，5月1.无钙任氏液无钙任氏液灌流细胞外液Ca2+↓↓心肌细胞动作电位期间Ca2+内流↓↓心肌细胞胞浆Ca2+↓↓心肌收缩力收缩↓↓第18页,共23页，星期六，2024年，5月细胞外液Ca2＋浓度升高工作细胞动作电位期间Ca2＋内流增加肌浆Ca2＋浓度增加兴奋收缩耦联增强心肌收缩力增强2.3%CaCl2慢反应细胞4期自动除极化速度增加自律性增加心率增快第19页,共23页，星期六，2024年，5月细胞外液K＋浓度升高K＋抑制Ca2＋内流收缩力↓Ca2＋内流↓兴奋收缩耦联削弱3.1%KClIK1通道通透性↑，K＋易于外流，对抗了If内流去极自律性↓第20页,共23页，星期六，2024年，5月如果任氏液中钾离子浓度明显增高，蛙心会处于什么状态？当细胞外显著高钾时，细胞膜内外钾浓度梯度减小，使得静息电位绝对值减小至－55mv，使得钠通道失活，从而使心肌细胞兴奋性丧失，心脏可停搏在舒张状态（当细胞外轻度高钾时，膜内外K＋浓度梯度↓，静息电位↓，RP与TP的差↓，兴奋性↑）第21页,共23页，星期六，2024年，5月心肌细胞膜β1受体结合Adr肌浆网对Ca2＋通透性↑动作电位期间Ca2＋内流性↑收缩力↑细胞膜对Ca2＋通透性↑4期自动除极化速度↑自律性↑心率↑4.肾上腺素（Adr）Ca2＋与肌钙蛋白亲和力↓，肌浆网摄钙速度↑舒张速度↑复极期肌浆Ca2＋浓度降低速度↑第22页,共23页，星期六，2024年，5月心肌细胞膜M受体结合细胞膜对K＋通透性增加自律性降低心率减慢细胞膜对Ca2＋通透性下降动作电位期间Ca2＋内流减少心肌收缩力降低窦房结细胞4期K+外流增加、最大复极电位增大ACh抑制钙通道5.乙酰胆碱（Ach）第23页,共23页，星期六，2024年，5月一、实验目的1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。2.观察各种理化因素对对离体心脏活动的影响。第2页,共23页，星期六，2024年，5月正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。

蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。二、实验原理

第3页,共23页，星期六，2024年，5月心肌细胞的生理特性表现为：自动节律性、兴奋性、传