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脑脊液检验
(CSF);侧脑室和第三,第四脑室脉络膜丛上皮细胞分泌和超滤形成;脑脊液的生理功能;脑脊液与临床疾病;脑脊液检验主要内容;一、标本采集与处理;做细菌培养;脑脊液穿刺的适应症;(一)接收:对标本进行核对和查验,对标本容器标识清晰、无明显外溢情况、标本量符合检验项目要求的脑脊液标本。
标本接收后应尽快检验,一般不超过1小时。如不能及时检验,则将标本保存于2℃~4℃环境中,并保证在4小时内完成检验。
(二)拒收:如标本存在信息不全、唯一性标识不清、标本外溢明显或量不足、或者存在其他影响检验结果准确性的因素时。;(三)检验后标本处理;二、一般性状检验;1.红色:脑脊液中混有血液时,因红细胞量的多少和出血时间的不同,可使标本呈红色、红褐色等。
如标本为血性,需区别穿刺性损伤(新鲜出血)或脑及蛛网膜下腔出血(陈旧性出血)。;1.红色,红褐色,淡红色:混有血液;2.黄色:脑脊液呈黄色称为脑脊液黄变症,常见于脑及蛛网膜下腔的陈旧性出血,由于红细胞破坏,血红蛋白降解所致。
蛛网膜下腔梗阻、脑脊液内蛋白质含量高、黄疸,以及进食大量的黄色素、类胡萝卜素脑脊液也可呈黄色。
;3.乳白色:由于白(脓)细胞增多所致,常见于各种化脓性细菌引起的化脓性脑膜炎。
4.绿色:见于铜绿假单胞菌、肺炎链球菌或甲型链球菌引起的脑膜炎等。
5.褐色或黑色:常见于脑膜黑色素瘤。
;(二)透明度;(三)凝固性;脑脊液同时出现胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离现象(蛋白质明显增高,细胞数正常或轻度增高),隐血试验阴性时称为Froin-Nonne综合征,此为蛛网膜下腔梗阻脑脊液的特征。
神经梅毒及脊髓灰质炎脑脊液中可出现絮状小凝块。
;(一)细胞总数计数
1.检验方法
(1)直接计数法:脑脊液混匀充池低倍镜计数计算。因脑脊液中细胞数量少,因此,需计数2个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。
(2)稀释计数法:混浊或血性的脑脊液,可用生理盐水或红细胞稀释液稀释后再充池计数,计算时乘以稀释倍数后再换算成每升脑脊液中的细胞总数。;2.质量保证
(1)为避免脑脊液标本???固,应尽快送检、尽快检验。遇高纤维蛋白原标本时,可用EDTA盐抗凝。
(2)脑脊液细胞计数应在标本采集后1小时内完成,以免放置过久,细胞变形、破坏或脑脊液凝固,导致计数不准确。
;3.方法学评价
直接计数法操作简便、省时,适用于细胞数不多的脑脊液标本。
稀释计数法适用于混浊的脑脊液标本,但操作相对烦琐,存在稀释误差。
4.参考区间正常人脑脊液无红细胞;仅有少量白细胞。
;(二)白细胞计数;2.质量保证
(1)直接计数时吸管内的冰乙酸要尽量除去,否则结果偏低。
(2)为了排除因出血而带来的白细胞数影响,可用下式进行校正:
WBC(校正)=WBC(未校正)-
;3.方法学评价直接计数法操作简便、省时,但未考虑吸管或试管内壁黏附的冰乙酸体积。
直接计数法适用于细胞总数不多的脑脊液标本。
稀释计数法红细胞破坏完全,结果相对淮确,但操作相对繁杂。
4.参考区间成人:(0~8)×106/L;儿童:(0~15)×106/L;
新生儿:(0~30)×106/L。
;(三)白细胞分类计数;2.质量保证
(1)标本:白细胞直接分类法误差较大,有条件的实验室应改用涂片染色。
(2)染色分类法标本离心时速度不宜太快、时间不宜过长,以减少细胞的破坏和变形。
(3)染色分类时,如见室管膜细胞应计入分类百分比中;若见肿瘤细胞,则另行描述报告。
(4)若白细胞总数少于10×106/L,可不作分类计数,但临床有细胞分析要求者例外。;3.方法学评价
直接分类法简便、快速,但较难观察清楚细胞内部结构,准确性较差。尤其是陈旧性标本,细胞形态改变大,仅凭高倍镜分类困难,误差较大。
染色分类法细胞识别率高,结果准确可靠,可以发现异常细胞(如肿瘤细胞),为首选方法,但操作较复杂、费时。
;4.参考区间
(1)直接分类法:多为淋巴细胞及单核细胞(7:3),偶见室管膜细胞。
(2)染色分类法:
①成人:淋巴细胞40%~80%,单核细胞15%~45%,中性粒细胞0%~6%
②新生儿:淋巴细胞5%~35%,单核细胞50%~90%,中性粒细胞0%~8%
;
;化脓性脑膜炎增殖期结核性脑膜炎增殖期;(四)病原生物学检验;四、化学检验;(一)蛋白质测定;;(1)蛋白质定性试验
1)潘氏试验(Pandytest)
试剂:饱和苯酚溶液,由苯酚和水组成。
原理:脑脊液中的蛋白质与苯酚结合,形成不溶性蛋白盐而出
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