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奈瑟菌属检验靖吉芳讲解.pptx

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7.1.4奈瑟菌属检验NEISSERIATEST靖吉芳

概念G-;球形;单个或成双排列触酶、氧化酶+脑膜炎奈瑟菌——流行性脑脊髓膜炎(流脑)淋病奈瑟菌——淋病

一、生物学性状G-,肾形或咖啡豆形;成双排列,凹面相对;无鞭毛和芽胞;新分离株大多有荚膜和菌毛。(一)形态与染色

一、生物学性状专性需氧。初次培养需提供5%~10%CO230-40°C生长,最适35°C;最适pH7.4-7.6营养要求高,在含有血清、血液或卵黄的营养培养基上生长。常用血琼脂平板、巧克力琼脂平板、卵黄双抗平板进行培养。淋病奈瑟菌还有专用的TM、MTM及NYC培养基。(二)培养特性

一、生物学性状血平板:灰色、湿润、透明或半透明、不溶血菌落。巧克力平板:圆形、灰蓝色、似露滴状菌落。(二)培养特性脑脊液标本18~24h菌落形态

一、生物学性状触酶、氧化酶实验均阳性。大多分解葡萄糖,产酸不产气。脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖+、淋病奈瑟菌-。(三)生化反应生化反应

一、生物学性状抵抗力弱:四怕—干燥、湿热、寒冷、消毒剂。60℃5min即死亡。干燥状态下1-2h、标本室温放置3h、培养物室温下3-4天不接种均可引起菌体死亡。对青霉素、金霉素敏感,但容易产生耐药性。(四)抵抗力

二、临床意义脑膜炎奈瑟菌——致病过程病人带菌者空气飞沫鼻咽腔抵抗力强抵抗力弱带菌者或轻微感染血脑脊髓膜化脓性脑膜炎菌量多内毒素血症菌量多高热(41-42℃)、头剧痛、喷射性呕吐、颈项强直、皮肤淤点、淤斑一过性菌血症DIC中毒性休克菌量少

二、临床意义淋病性传播疾病(STD)之一传染源:人类是唯一宿主传播途径:性传播;间接感染新生儿淋菌性结膜炎1%硝酸银滴眼

三、微生物学检验根据情况合理采集相应标本。疑为流脑患者,可采淤血点穿刺液、血液、脑脊液、浆膜腔穿刺液,带菌者检查可用鼻咽拭子。疑为淋球菌感染可视情况采集分泌物、咽拭子、肛拭子等。新生儿结膜炎时应采取眼结膜表面分泌物。(一)标本采集

三、微生物学检验(二)检验程序脑脊液离心沉淀涂片染色初步报告脓液、分泌物(淋)、瘀斑穿刺液、鼻咽拭子、浆膜腔穿刺液(脑)血液增菌培养(葡萄糖肉汤,5%CO2)分离培养(巧克力琼脂平板,5%CO2)可疑菌落涂片染色氧化酶试验糖发酵试验血清凝集试验药敏试验报告

奈瑟菌属初步确定为奈瑟菌属;涂片革兰染色见阴性双球菌;菌落特征相符;触酶、氧化酶试验阳性。进一步进行葡萄糖和麦芽糖发酵试验阳性、其他糖类发酵阴性可确定为脑膜炎奈瑟菌。只分解葡萄糖产酸不产气,不分解麦芽糖,可确定为淋病奈瑟菌。平板上没有发现菌落需继续观察72h后无菌生长可报告为阴性。主要鉴定依据

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