时基因工程的基本工具.ppt

解析(1)蛋白质工程首先要根据已有蛋白质,从预期的蛋白质功能出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相应的脱氧核苷酸序列,合成目的基因,再通过基因工程产生转基因生物。(2)将目的基因导入植物细胞的方法有：农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法,其中有80%的转基因植物都是通过农杆菌转化法产生的。(3)动物细胞核的全能性受细胞质的抑制,故目的基因需注入到受精卵中,再将注射了目的基因的受精卵移植到雌性动物的输卵管或子宫内,使其发育成具有新性状的动物。

(4)转基因生物可造成基因污染等不良影响。第62页,共67页，星期六，2024年，5月答案(1)分子结构及预期功能基因(2)农杆菌浸染法首先将目的基因与质粒组合,构建基因表达载体,将含目的基因的表达载体导入植物细胞,通过植物组织培养获得表现新性状的植物(3)显微注射法胚胎分割(4)转基因生物及其产品对生物多样性、生态环境可能产生的影响主要表现在以下几个方面：①转基因生物打破了物种的原有界限,改变了物质循环和能量流动,对生态系统的稳定性造成破坏;②重组DNA与微生物杂交,可能出现对动、植物和人类第63页,共67页，星期六，2024年，5月有害的病原微生物;③增加目标害虫的抗性和进化速度;④转基因植物通过传粉进行基因转移,导致超级杂草出现;⑤转基因植物的花粉如含有有毒蛋白或过敏蛋白,通过蜜蜂的采集,很可能进入蜜蜂中,再经过食物链的传递,最后有可能进入其他动物和人体内。第64页,共67页，星期六，2024年，5月实验3DNA的粗提取和鉴定复习要求1．了解DNA的物理化学性质，DNA的溶解性。2．二苯胺法鉴定DNA的方法和原理。3．说明实验原理；明确每一步操作的道理；能够设计实验装置；学会控制实验条件；分析和评价实验方案、实验装置、实验成败的原因第65页,共67页，星期六，2024年，5月一、提取DNA的方法原理1、DNA粗提取的基本思路：就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学方面的差异，提取DNA，去除其他成分。2、DNA的理化性质（1）DNA的溶解性①在NaCl溶液中：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同：由曲线可以看出，DNA在浓度为_______mol/L的NaCl溶液中溶解度最小。②DNA酒精，而细胞中的某些蛋白质则溶于该溶液，可以利用这一原理对DNA与蛋白质进一步分离。（2）DNA的鉴定：在___________条件下，DNA遇__________会被染成。第66页,共67页，星期六，2024年，5月二、实验设计与操作（一）实验材料的选取1、可选取植物（如洋葱、菜花、香蕉等）、动物（如猪肝、鸡血等）和微生物（如大肠杆菌等）。2、鸡血细胞的制备柠檬酸钠3克活鸡血100ml500ml烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min离心2min→吸去上清液第67页,共67页，星期六，2024年，5月目的基因转移转化或感染合成基因组织、器官、细胞基因组DNAcDNA文库基因文库目的基因的克隆第二步：基因表达载体构建第30页,共67页，星期六，2024年，5月1.构建基因表达载体目的使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。第二步：基因表达载体构建2.基因工程载体的构建需要考虑的因素（1）基因的特点（2）要选择强启动子（3）要有选择标记基因第31页,共67页，星期六，2024年，5月4.基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因所有生物的DNA的基本结构相同（不同生物DNA都是由4种脱氧核苷酸构成，都具有双螺旋结构，都遵循A-T、G-C的碱基配对原则）3.不同生物的DNA可以拼接在一起的原因：第32页,共67页，星期六，2024年，5月启动子、终止子以及起始密码子、终止密码子所存在的位置及作用？

?启动子、终止子存在于DNA上；起始密码子、终止密码子存在于mRNA上。?启动子并不是转录的