核酸核酸检测技术68讲解.pptxVIP

核酸核酸检测技术Nucleicaciddetectiontechnology琼脂糖凝胶电泳

核酸分离细胞裂解核酸分离纯化细胞裂解

核酸鉴定完整性浓度纯度凝胶电泳紫外分光光度法荧光光度法（一）核酸的鉴定核酸鉴定

浓度测定紫外分光光度法核酸分子在260nm有最大吸收峰当A260=1OD时C双链DNA=50μg/mlC单链DNA=40μg/mlC单链RNA=40μg/ml

纯度分析A260/A280比值通常：纯的DNAA260/A280=1.8污染：DNAA260/A280﹥1.8提示有RNA污染纯的RNAA260/A280=2.0﹤1.8提示有蛋白质或酚的污染

琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶电泳常用于分离、鉴定核酸，由于这种方法操作方便，设备简单，需样品量少，分辨能力高，已成为基因工程研究中常用实验方法之一。琼脂糖凝胶电泳

配胶琼脂糖1XTAE电泳缓冲液

不同浓度琼脂糖分离DNA分子的范围琼脂糖浓度(%)分离范围(kb)0.35-600.61-200.70.8-100.90.5-71.20.4-61.50.2-42.00.1-3

溴化乙锭（EB）溴化乙锭是最常用的DNA和RNA