核酸核酸检测技术95讲解.pptxVIP

核酸Nucleicaciddetectiontechnology核酸检测技术核酸的理化性质

一、核酸的一般理化性质核酸为两性分子，通常表现为酸性；DNA是线性高分子，粘度极大，具有胶体性；电泳法分离核酸：不同核酸分子量和所带电荷不同；在碱性溶液中，DNA稳定性强于RNA。

二、核酸的紫外吸收特性在260nm波长有最大吸收峰，是由碱基的共轭双键决定的。这一特性常用作核酸的定性、定量分析。

OD260的应用OD260=1.0相当于50?g/ml双链DNA40?g/ml单链DNA（或RNA）20?g/ml寡核苷酸1.DNA或RNA的定量DNA纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品:OD260/OD280=2.02.判断核酸样品的纯度DNA其OD260/OD280在1.6-1.8之间，低于此范围表明蛋白质含量超标，高于此范围表明样品中含有RNA。

三、核酸的变性与复性定义在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程（一级结构没有被破坏）。变性因素过量酸，碱，加热等。变性后理化性质的主要改变：OD260增高 粘度下降

DNA变性的本质是双链间氢键的断裂

增色效应：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。DNA的紫外吸收光谱

解链曲线：在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。

Tm：紫外光吸收值达到最大值的50%时