植物细胞工程基本原理.pptVIP

细胞脱分化（dedifferentiation)是指失去已分化细胞的典型特征，或消除了细胞分工，使之回复到分生组织状态，或胚性细胞状态。Flash细胞脱分化阶段 启动阶段，表现为细胞质增生，并开始向细胞中央伸出细胞质丝，液泡蛋白体出现； 演变阶段，此时细胞核开始向中央移动，质体演变成原质体； 脱分化终结期，细胞回复到分生细胞状态，细胞分裂即将开始。一个植物细胞向分生状态回复过程所能进行的程度，取决于它在自然部位上所处的位置和生理状态。第5页,共36页，星期六，2024年，5月第6页,共36页，星期六，2024年，5月第7页,共36页，星期六，2024年，5月愈伤组织(callus)：脱分化后的细胞，往往经过细胞分裂形成一团无特定结构和功能的松散的薄壁细胞团。草莓烟草第8页,共36页，星期六，2024年，5月细胞再分化（redifferentiation)：脱分化后的分生细胞（愈伤组织）在特定的条件下，重新恢复细胞分化能力，并经历器官发生形成单极性的芽或根，或经历胚胎发生形成双极性的胚状体，进一步发育成完整植物体的过程。极性：是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。 在很多情况下，细胞的不均等分裂是细胞极性建立的标志。第9页,共36页，星期六，2024年，5月细胞全能性脱分化再分化个体再生细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的，在大多数情况下，脱分化是细胞全能性表达的前提，再分化是细胞全能性表达的最终体现。细胞分裂细胞全能性与脱分化和再分化的关系第10页,共36页，星期六，2024年，5月器官发生植物的离体器官发生是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根（adventitiousroots）、不定芽（adventitiousshoots）等器官的过程。通过器官发生形成再生植株有三种方式：第11页,共36页，星期六，2024年，5月先芽后根第12页,共36页，星期六，2024年，5月先根后芽第13页,共36页，星期六，2024年，5月在愈伤组织的不同部位形成芽和根，再通过维管组织的联系形成完整植株。第14页,共36页，星期六，2024年，5月植株再生两种途径：器官发生途径:根芽器官直接分化形成植株体细胞胚胎发生途径:产生具有胚芽、胚根的胚状体结构再形成植株第15页,共36页，星期六，2024年，5月植物体细胞胚胎发生胚状体：（embryoid）亦称体细胞胚或体胚。在体外，由体细胞（非合子细胞）经胚胎发育产生的类似胚胎的结构。其发育过程与合子胚类似，经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷形胚及子叶胚等几个阶段。在其发生的最早阶段就具有两极性，即根端（胚根）和茎端（胚芽），并且与母体细胞或外植体的维管束无直接联系胚状体一开始就是一个完整植物的雏形，可通过根端或类似胚柄结构从外植体或愈伤组织中取得营养。很容易从愈伤组织的表面脱离下来，在适宜条件下长成一株植物。第16页,共36页，星期六，2024年，5月魔芋体细胞胚魔芋第17页,共36页，星期六，2024年，5月如何鉴别胚状体？（I）与器官发生形成个体的途径相比：胚状体具双极性（doublepolarity）生理隔离（physiologicalisolation）遗传性相对稳定 由于大多数体细胞胚起源于单细胞，因此对于单个植株来讲，通过体细胞胚形成的再生植株，其遗传特性相对稳定。重演受精卵形态发生的特性。第18页,共36页，星期六，2024年，5月如何鉴别胚状体？（II）与合子胚相比：合子胚在发育初期具有明显胚柄，体细胞胚没有真正的胚柄合子胚的子叶是相当规范的，要以作为分类的依据，而体细胞胚的子叶常不规范，有时具有两片以上的子叶与相同植物相比，体细胞胚体积明显小于合子胚体细胞胚没有休眠，而合子胚胚胎发育完全进入子叶期以后，经过一系列的物质积累和脱水就进入休眠。第19页,共36页，星期六，2024年，5月类似于动物胚胎早期的发育胚胎细胞发生发育早期2次均等分裂胚结构形成第20页,共36页，星期六，2024年，5月体细胞胚胎发生途径胚状体可从离体培养的各种外植体上直接或间接地发生，大致分为五种：直接从器官外植体上发生(以叶片为例）愈伤组织发生悬浮培养细胞发生单倍体细胞发生原生质体发生第21页,共36页，星期六，2024年，5月体细胞胚胎发生途径1：叶片

诱导阶段胚胎发育阶段(兰草,Chen等,1999)兰草第22页,共36页，星期六，2024年，5月体细胞胚胎发生途径2：愈伤组织诱导愈伤组织形成愈伤组织胚性化球